Лабораторные методы исследования

Для количественного определения изоферментов ЛДГ существует ряд методов, основанных на различии в апоферменте изозимов. Применяют методы электрофореза, хроматографии, термической инактивности и др. В клинике наиболее широко используется метод зонального электрофореза на агаровом геле с окрашиванием тетрахолиевыми солями, адсорбция на ДЗАЕ-целлюлозе и термическое инактивирование. Наиболее точны и надежны методы, основанные на электрофоретическом разделении изоферментов [Юрков Ю….

После окончания электрофореза пластинки перекладывают в специальную камеру для окраски, заливают красящую смесь и инкубируют в термостате 2 ч при 37 °С. Затем сливают смесь и несколько раз тщательно промывают агаровые пластинки дистиллированной водой. Сушку пластинок производят следующим образом: вырезанные по форме пластинки полоски хроматографической бумаги осторожно накладывают на агар, не сдвигая его. На чистую…

Общая активность ЛДГ в моче больных пиелонефритом в среднем достигает 37,5 ± 3,5 единицы Вроб-левского, но какой-либо зависимости ее от формы и степени тяжести пиелонефрита не отмечено. Перспективными для изучения при воспалительных заболеваниях почек являются ферменты малатдегидрогеназа (МДГ) и альдолаза (АЛД). МДГ относится к ферментам цикла Кребса, который катализирует обратимую реакцию окисления яблочной кислоты в…

Исследуемые сыворотки разводят 1:10 с помощью кроличьей сыворотки (в разведении 1:250), подогревают в электрической водяной бане при 54 °С в течение 20 мин (для разрушения комплемента) и охлаждают. Затем к ним добавляют формалинизированные или свежие эритроциты барана из расчета 0,2 мл на 1 мл сыворотки, содержимое пробирки встряхивают и помещают на 30 мин в термостат…

Приготовленные Аг разводят определенным количеством буфера (рН 6,4) и соединяют с раствором формалинизированных и танизированных эритроцитов в таком количестве, чтобы окончательное разведение Аг было 1:10. Установлено, что именно это разведение является оптимальным, так как не дает гемолиза или агглютинации эритроцитов в отсутствие специфической сыворотки. Содержимое колбочек встряхивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 1…

Свежевыпущенную мочу центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин, отсасывают надосадочную жидкость и осадок дважды промывают в изотоническом растворе хлорида натрия с фосфатным буфером (рН 7,3). В отмытый осадок добавляют 0,2 мл разведенной 1:5 люминесцирующей кроличьей сыворотки против глобулинов человека. Осадок мочи вместе с сывороткой инкубируют при 37 °С в течение 30 мин, после…

В основе развития пиелонефрита лежит бактериальный воспалительный процесс, поэтому одним из ведущих лабораторных тестов является микробиологическое исследование мочи. Е. Kass (1965) называет бактериурию «ключом» пиелонефрита и считает ее обязательным его компонентом. Отечественные исследователи [Рябинский В. С, Ромодан В. Е., 1968; Пытель А. Я., .1970; Лопаткин Н. А., 1979, и др.] показали, что бактериурия является одним…

Для исследования используют утреннюю порцию мочи. С целью очищения мочи от ингибиторов мочу подвергают диализу в коллодиевых или целлофановых мешочках. Для диализа можно использовать дистиллированную воду, фосфатные буферы или проточную водопроводную воду. Для определения общей активности мочевой ЛДГ необходимы следующие реактивы: фосфатный буфер (рН 7,2) Ма2НРО4 * 0,8 мл 1/ 15 К2Н2РО4 (72 мл), пируват…

Основными функциями почек являются: выделительная (удаление конечных продуктов обмена), гомеостатическая, направленная на сохранение постоянства внутренней среды организма, внутрисекреторная и функция регуляции артериального давления и эритропоэза. При поражении почек изучение функционального состояния их приобретает важное значение, так как может служить как для диагностических целей (особенно при раздельном изучении почек), так и в качестве прогностического контроля, ибо…

Для проведения пробы необходимы реактивы: 1,2% раствор пикриновой кислоты, 10% раствор едкого натрия и стандартный раствор креатинина (100 мг креатинина растворяют в 100 мл 0,1% раствора хлористоводородной кислоты). Из этого основного раствора готовят рабочим путем разведения 1 мл основного раствора в 100 мл дистиллированной воды. 1 мл рабочего раствора содержит 0,1 мл креатинина (исследование производят…

К 0,1 мл мочи добавляют 0,6 мл 1,2% раствора пикриновой Э0 кислоты и 0,04 мл 10% раствора едкого натра. Доводят объем до 10 мл дистиллированной водой. Готовят стандартную пробу (0,05 мл основного раствора креатинина, 0,6 мл 1,2% раствора пикриновой кислоты, 0,04 мл 10% раствора едкого натрия и доводят до 10 мл дистиллированной водой). Все пробы…

Почечный кровоток — это количество крови, которое протекает через деятельную часть почечной паренхимы в течение минуты. О почечном кровотоке удается судить на основании определения клиренса вещества. В частности, клиренс ПАГ и диодраста очень близок к величине почечного кровотока. С помощью этих веществ устанавливают объем плазмы крови, протекающей через почки в 1 мин. Если известны показатели…