Механизмы вирусного онкогенеза

Получена ДНК-копия нуклеотидных последовательностей, присутствующих только в саркомных и отсутствующих в лейкозных вирусах, т. е., вероятно, ответственная за злокачественную трансформацию ДНК sarc с размером около 2600 нуклеотидов. Все штаммы RSV содержали sarc-последовательности, которые отсутствовали в РНК вирусов лейкозов птиц и сарком мышей, а также в геноме ДНК-содержащих онкорнавирусов. Sarc-специфические последовательности обнаружены и в нормальных клетках…

Показано, что в нормальных клетках мышей линии NIH нет последовательностей, специфичных для эндогенного вируса Gross — AKR. После инфекции в таких клетках происходит интеграция 3 — 4 копий этих последовательностей на гаплоидный геном клетки (Chattopadhyay et al., 1976). В нормальных клетках AKR последовательности Gross — AKR присутствуют в количестве 3 — 4 копий на гаплоидный…

На основании имеющегося экспериментального материала была предложена следующая модель синтеза ДНК. Начальный этап ДНК происходит в репликационном комплексе, содержащем молекулы ДНК, связанные водородными связями с молекулами вирусной РНК. Каждая молекула ДНК вытесняется как однонитевая молекула (минус-нить) в результате синтеза последующей минус-нити ДНК. Синтез двуспиральной ДНК следует за синтезом односпиральной ДНК, которая является матрицей для синтеза…

Изложенные выше факты позволяют представить общие начальные этапы процесса репликации онкорнавирусов и трансформации, индуцированной ими. Вирусспецифическая ДНК синтезируется обратной транскриптазой в цитоплазме пермиссивных клеток в течение первых 9 ч инфекции, а в непермиссивной системе синтез продолжается до 12 ч. Синтез ДНК, направляемый РНК-зависимой ДНК-полимеразой разрушенного RSV, инициируется in vitro путем ковалентного присоединения дезокси-нуклеотидов к 3´-концу…

Исследование распределения вирусспецифических последовательностей в ДНК клеток различных органов незараженных и зараженных AMV цыплят показало, что все нормальные ткани содержат примерно равные количества ДНК, комплементарной 35S РНК AMV, что соответствует 1 — 3 копиям на гаплоидный клеточный геном. У зараженных цыплят все ткани можно разделить на 3 категории: мышцы и мозг, в которых концентрация вирусной…

Обнаружено, что ревертаза AMV способна транскрибировать вирусный геном в ДНК независимо от того, где локализована затравка три-тРНК или олиго-(дТ), на 5´-конце вирусной РНК или на 3´-конце молекулы (Collett Faras, 1977). Это означает, что ДНК-транскрипты, инициируемые на три-тРНК-затравке на 5´-конце вирусной РНК, содержат также последовательности, присутствующие и в других частях генома и, возможно, на 3´-конце. Darlix…

Для обратной транскриптазы, как и всякого фермента, осуществляющего полимеризацию нуклеотидов, требуется наличие в полимеразной смеси компонентов, из которых прежде всего необходима матрица. В данной системе различают три типа матриц. Первый тип — эндогенная матрица. Этот термин применяют только тогда, когда в качестве матрицы используют вирионную высокомолекулярную РНК, а в качестве фермента — разрушенный онкорнавирус. Второй…

Уровень активности ревертазы пропорционален количеству вирусных частиц. Минимальная активность (по числу включенных пикомолей дГТФ на одну вирусную частицу за 1 ч) составила 28,1±4,2Х10-7 для AMV и 1,1±0,2X10-7 для Ra — MuLV (Liebes et al., 1976). Очищенная полимераза AMV служит субстратом в реакции фосфорилирования, катализируемой очищенной протеинкиназой из того же источника (Tsiapalis, 1977). Степень фосфорилирования регулирует…

«Ранний» (на 20-й минуте реакции) эндогенный продукт, как показал его анализ, представляет собой ДНК, ассоциированную с 60 — 70S-вирионной РНК. С помощью обработки ферментами и равновесного центрифугирования в градиенте плотности Cs2SO4 установлено, что основная 8 — 10S-фракция на 12-й минуте реакции содержала примерно равное количество односпиральной ДНК (в зоне с плотностью 1,42 — 1,44 г/мл,…

Проведена детекция неинфекционных фрагментов ДНК из клеток, зараженных вирусом лейкоза птиц, с помощью спасения маркера. Этот метод оказался менее эффективным, чем тест на инфекционную ДНК RSV (Cooper, Castellot, 1977). Установлено, что генетические маркеры для ДНК-полимеразы (pol) и оболочки (env) связаны и локализованы на одном и том же Е. coli RI-фрагменте ДНК из зараженных RSV-клеток. Успешно…

Установлено, что синтез вирусной ДНК при заражении онкорнавирусами птиц чувствительных клеток в зависимости от множественности инфекции обнаруживается через 1 — 9 ч и продолжается до 48 ч, затем снижается. Интеграция начинается через 16 ч, а количество вирусной ДНК, ассоциированной с клеточной ДНК, возрастает до 72 ч после чего остается на достигнутом уровне. Процесс синтеза вирусной…

Количество неинтегрированной ДНК варьирует, но может составлять более 75% от общего количества вирусспецифической ДНК в недавно инфицированных клетках и от 20 до 70% в полностью трансформированных клетках. Неинтегрированная вирусная ДНК в любом случае представлена дуплексами с минус-нитями с длиной, соответствующей длине субъединице вирусного генома массой 2,5 — 3,0Х106 и относительно короткими плюс-нитями — 0,5 —…