22 мая 2012

Родство геномов онкорнавирусов

Родственные отношения между различными онкорнавирусами во многих работах исследовались методом молекулярной гибридизации.

Чаще всего для этой цели использовали гибридизацию между меченой вирионной РНК и избытком синтезированного в присутствии актиномицина D in vitro 3Н-ДНК-продукта. Уровень образования ДНК — РНК-гибридов контролировали с помощью нуклеазы Sb специфичной в отношении однонитевой ДНК.

Оказалось, что все исследованные эндогенные вирусы различных классов животных, по полученным данным, неродственны между собой. Эндогенные вирусы кошек (ССС и RD114) неродственны с FeLV, но в то же время эндогенный вирус мышей обладает высоким сродством (более 46% гомологии) с другими мышиными онкорнавирусами.

Следовательно, эндогенные вирусы по нуклеотидной последовательности могут быть как отличны, так и сходны в определенном количественном отношении с онкорнавирусами, онкогенными для данной ткани.

С помощью перекрестной гибридизации обнаружено, что мышиные вирусы С-типа можно разделить на 4 различающиеся, но родственные подгруппы:

  1. вирусы Френд и Раушера,
  2. вирусы лейкоза Гросса,
  3. вирус саркомы Молони,
  4. вирус саркомы Кирстен.

Двух представителей вирусов кошек — штамм Рикард вируса саркомы и вирус RD114 относят к собственной неродственной субгруппе, причем для штамма Рикард характерен определенный уровень гомологии с представителями других групп, а для вируса RD114 гомология с вирусами мышей вообще отсутствует.

Онкорнавирусы разных видов животных также в основной массе неродственны друг другу, т. е. они значительно различаются между собой по данным молекулярной гибридизации (менее 10% гомологии). Выявлен определенный уровень родства (до 28% гомологии) между различными вирусами приматов и мышей и среди них в большей степени с вирусами субгруппы Кирстен.

Считают, что в силу этого обстоятельства 3Н-ДНК-продукты мышиных онкорнавирусов можно использовать для обнаружения вирусспецифической информации в клетках приматов и человека.

Установлено, что генетическая близость между РНК М — PMV и РНК SSV, MTV, MuLV, AMV и энедогенного вируса морских свинок отсутствует. По тесту молекулярной гибридизации один из изолятов вируса из клеток HeLa и вирус из клеток АО не отличаются от М — PMV.

Нуклеотидных последовательностей, родственных М — PMV, не обнаружено в тканях 11 различных видов животных, а также человека (Colcher et al., 1976).

Представленные данные свидетельствуют о том, что М — PMV не является эндогенным вирусом животных (обезьян, кошек, собак, коров, мышей, кроликов, крыс, баранов) и, по-видимому, принадлежит к отдельной таксономической группе онкорнавирусов.

«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко



Установлено, что представители онкорнавирусов 5 основных субгрупп (А, В, С, D и Е) иммунологически неотличимы по р27 при гомологичном типировании, осуществляемом с помощью радиоиммунологического теста. Напротив, у каждого из трех низкомолекулярных вирусных полипептидов (р19, р15, р12) выявлены типоспецифические детерминанты. Оказалось, что представители субгрупп А, В и Е содержат идентичную генетическую информацию, ответственную за синтез низкомолекулярных…

SSV и GLV приматов относятся ко II классу экзогенных вирусов С-типа, так как оба вируса были изолированы из опухолей обезьян и онкогенны для своих хозяев, т. е. при инъекциях индуцируют неоплазии. Геном этих вирусов не имеет комплементарных последовательностей в ДНК клеток приматов, передается горизонтально и обнаруживается в лимфомах, саркомах и при лейкозах. Ревертазы этих вирусов…

Весьма существенно, что при инфекции экзогенными онкорнавирусами во многих системах, например, клеток кошек вирусом FeLV или клеток крыс вирусами приматов, происходит активация эндогенных вирусов. Подобное тестирование синтеза РНК эндогенных вирусов в инфицированных клетках методом молекулярной гибридизации можно использовать для исследования вновь выделенных вирусов. Кроме того, 3Н-ДНК-продукты могут найти широкое применение для обнаружения включения генетического материала…

Масса вирионов онкорнавирусов равна приблизительно 450X106. Вирионы термолабильны и инактивируются эфиром и другими растворителями липидов, так как окружены мембраной, содержащей значительное количество липидов. Например, в состав вириона миелобластоза птиц входит 2,5% РНК, 35% липидов и около 60% белка. Вирус Биттнера содержит 30% липидов, 2% РНК и 68 белка. Фосфолипиды вирионов онкорнавирусов значительно отличаются по составу…

Частицы В-типа диаметром 80 — 120 нм обладают электронно-оптически плотным асимметрично расположенным нуклеоидом размером около 50 нм, имеющим отчетливо различимую одинарную мембрану. На наружной поверхности вирионов находятся отростки с длиной не более 7 — 10 нм и диаметром 7,5 нм. Для вирионов В-типа характерен высокий полиморфизм, основное отличие их морфогенеза от вирусов С-типа — формирование…