14 декабря 2010

Приготовление раствора аммиачного серебра

В 40 мл дистиллированной воды растворяют 80 мг нитрата серебра. К 10 мл раствора прибавляют 8 капель 40% гидроокиси натрия до получения осадка. Затем по каплям продолжают добавлять аммиак до растворения осадка, после чего до 40 доливают дистиллированную воду. Раствор должен быть бесцветным.

Окраска азокармином по методу Гейденгайна выявляет белки соединительной ткани и плазмы крови. Фиксировать материал можно в формалине, жидкости Карпуа, но лучше в смеси Ценкера. Срезы из дистиллированной воды переносят на 10 мин в подогретый раствор азокармина (в термостате при 50 — 60 °С).

Охлажденные препараты ополаскивают дистиллированной водой, дифференцируют в анилиновом спирте до четкого выявления ядер, отмывают в 1 % уксуснокислом спирте, ополаскивают дистиллированной водой, в течение 1,5 ч выдерживают в 5% растворе фосфорно-молибденовой кислоты, затем 30 мин в дистиллированной воде (в темноте).

После этого препараты помещают на 10 мин в смесь анилинового синего и оранжевого Г (0,5 г водорастворимого анилинового синего + 2 г оранжевого Г + 100 мл дистиллированной воды + 8 мл ледяной уксусной кислоты), ополаскивают дистиллированной водой, дифференцируют в 96% спирте до четкого выявления волокнистой ткани, которая должна быть окрашена в синий цвет.

Проводят через спирты восходящей концентрации, просветляют в ксилоле и заключают в канадский бальзам. Неизмененный коллаген окрашивается в ярко-синий цвет, а отложения плазменных белков и фибрина — в красный.

«Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи»,
Г.М.Цветкова, В.К.Мордовцев

Читайте далее:





Фиксация особенного значения не имеет, срезы можно приготовить на замораживающем микротоме, а также после заливки в парафин. Перед окрашиванием их помещают в изотонический раствор хлорида натрия на 3 ч при температуре 37 °С, затем переносят в 0,5% раствор толуидинового синего на 18 ч. После этого срезы быстро промывают в трижды сменяемой дистиллированной воде, высушивают фильтровальной…

Биопсию кожи лучше производить циркулярным полном, который значительно упрощает взятие материала и не травмирует прилежащие участки. Для постановки патологоанатомического диагноза большое значение имеют правильная фиксация и последующая обработка биопсированного кусочка кожи. Лучшим фиксатором для обычных гистологических целей является 10% нейтральный формалин. Его количество должно превышать в 50 раз объем биоптата. Так, биоптат размером 1 X…

Гистохимические методы исследования в основном применяются для научных целей, однако некоторые из них имеют диагностическое значение, как, на пример, ШИК-реакция, окраска альциановым голубым или толуидиновым синим, азаном по методу Гейденгайна и др. С помощью ШИК-реакции выявляют полисахариды: гликоген и муконолисахариды (МПС), особенно нейтральные. Эта реакция необходима для определения ШИК-положительных фибриноида и фибрина. Грибы и хитиновые…

Метод Шифф — йодная кислота применяется для выявления гликогена и нейтральных МПС. Наиболее распространена модификация Хочкисса и МакМануса. Фиксация и способы приготовления срезов различны. Срезы из дистиллированной воды переносят на 15 мин в раствор нерйодата натрия или калия (350 мг перйодата калия или натрия + 50 мл дистиллированной воды + 0,5 мл 35% азотной кислоты),…

Срезы, полученные из материала, фиксированного разными способами, помещают в 12% нейтральный формалин на 1 сут, после чего ополаскивают их дистиллированной водой и оставляют в ней на 10 — 15 мин. Затем срезы переносят в раствор перманганата калия (100 мг перманганата калия + 40 мг дистиллированной воды) на 10 мни, хорошо отмывают в нескольких порциях дистиллированной…