Макромолекулярные механизмы биологического взаимодействия онковирусов с клеткой

Интеграция и хромосомная локализация вирусных геновКовалентная интеграция вирусного и клеточного геномов, приводящая к образованию единой генетической структуры, является твердо установленным фактом для онковирусов группы папова, аденовирусов и онкорнавирусов. В отношении вирусов группы герпеса показано, что устойчивые к действию щелочей связи между вирусной и клеточной ДНК отсутствуют, хотя при их взаимодействии могут происходить щелочнолабильные нековалентные связи….

Использование кинетики реассоциации меченой вирусной ДНК в присутствии немеченой ДНК из нормальных и трансформированных вирусом полиомы и SV40 клеток хомяка и мыши позволило определить число вирусных ДНК-копий. Для исследованных культур оно колебалось от 1 до 8,75 в расчете на диплоидный геном, в среднем выявляются два геномных эквивалента вируса. Однако, как выяснилось, частота встречаемости каждого из…

После обработки EcoRI ДНК А12 выделен фрагмент С (16% левой части вирусного генома). При использовании ДНК-полимеразы из Е. coli на матрице ДНК А12 и С-фрагмента in vitro синтезирован ДНК-продукт, с помощью которого был осуществлен анализ на присутствие в геноме опухолевых клеток человека и грызунов последовательностей ДНК А12, в том числе и трансформирующих. В первую очередь…

Показана идентичность геномов ВЭБ, обнаруживаемых в клетках лимфомы Беркитта, карциноме носоглотки и при инфекционном мононуклеозе. Вирусная ДНК из клеток карциномы носоглотки в градиенте глицерина разделялась на два компонента: 101S и 64S, т. е. на ковалентнозамкнутую и открытую циркулярную формы ДНК соответственно. Наличие полноценных ковалентнозамкнутых форм вирусной ДНК подтверждено также электронной микроскопией. Молекулярная масса циркулярных ДНК…

Фрагменты ДНК SV40, обладающие трансформирующей активностью, содержат один ранний А-ген, включающий 48% емкости генома. Эндорестриктаза Нра I, которая вызывает разрыв в ранней области, блокирует трансформирующую активность генома SV40. Фрагмент В (0,375 — 0,735 ед. карты) составляет 36% генома и содержит около 60% его ранней области, кодирующей синтез полипептида с молекулярной массой 40 000 — 50…

Картирование ранней цитоплазматической мРНК вируса PY показало, что 5´-конец располагается на границе Е- и С-фрагментов ДНК, полученных при помощи ре-стриктазы Нра II, в точке 72 ед. карты от точки разрыва Е. coli RI, а 3´-конец — во фрагменте на расстоянии 25 — 26 ед. карты. Ядра из клеток ЗТЗ (пермиссивная система) через 30 ч после…

При составлении генетических карт онкогенных вариантов аденовирусов использовали те же самые экспериментальные подходы, что и для мелких ДНК-содержащих онковирусов. При действии рестриктазы Е. coli RI на ДНК аденовируса человека 2-го типа образуется 6 фрагментов, последовательность которых в геноме А2 известна. Обнаружено, что ранние мРНК, содержащие поли-А-последовательности, транскрибировались в основном с А-, В- и D-фрагментов ДНК…

Паповавирусы За последние годы разработаны следующие методики исследования молекулярно-генетической структуры генома SV40: анализ функций фрагментов ДНК SV40 различной длины, интегрированных в определенные участки некоторых аденовирусных генов (недефектные гибриды Ad2+XSV40); эта система рассматривается как модель взаимодействия SV40 с ДНК клетки-хозяина, специфические разрывы молекул ДНК SV40 с помощью ограничивающих бактериальных эндонуклеаз (рестриктаз). Кроме того, наличие асимметрического неодновременного…

Установлено, что репликация ДНК начинается внутри специфического участка на сегменте Н. influenzae С, т. е. в 0,67 ед. карты (в области 0,655 — 0,68 ед.). Затем синтез идет в обе стороны циркулярной молекулы примерно с одинаковой скоростью и терминируется внутри сегмента Н. influenzae G (0,15 ед. карты). Для определения участков синтеза ранних и поздних РНК…

С помощью рестриктазы Нае III установлено, что в геноме SV40 имеется участок длиной около 140 нуклеотидов, вариации в котором и вызывают основные изменения в свойствах вирусных частиц (Newbold, 1976). Пока этот фрагмент еще точно не локализован, по-видимому, он ассоциирован с участком, кодирующим поздние функции. Не получено прямых доказательств в пользу транскрипции этой части генома, однако…

Влияние физиологического состояния клетки на репродуктивный цикл различных вирусов исследуют на синхронизированных тем или иным способом культурах. Заражают такие культуры в различных периодах клеточного цикла и учитывают время появления инфекционного вируса или определенных вирусных продуктов, сопоставляя результаты с фазой клеточного цикла. Таким способом, например, установлена зависимость продолжительности латентного периода от стадии клеточного цикла, на которой…

На ядерной мембране существуют специальные участки синтеза вирусной ДНК, для освобождения которой необходим постоянный синтез белка. По-видимому, новообразованная вирусная ДНК быстро соединяется с клеточными гистонами. Анализ таких нуклеопротеидных комплексов показал, что они представлены двумя формами — А и В. Комплекс А содержит репликативную ДНК вируса, комплекс В — зрелую ДНК I. ДНК комплекса А гетерогенна…