6 февраля 2012

Цитотоксические сыворотки с различными биологическими свойствами

Используя в качестве антигена внутриклеточные структуры (микросомы, ядра, митохондрии), можно получить цитотоксические сыворотки с различными биологическими свойствами, отличающиеся по своему действию на отдельные процессы жизнедеятельности клетки (Зайчик, 1969, 1972; Колобаев, Павлов, 1976).

Показано, что сыворотки, выработанные к отдельным клеточным органоидам оказывали более избирательное влияние, чем сыворотка, полученная к цельной ткани (Петрунь и др., 1970; Зайчик, Вереникина. 1972).

Менее однозначные результаты были получены при изучении органной специфичности цитотоксических сывороток, полученных, к внутриклеточным структурам. Одни авторы на основании серологических исследований пришли к выводу, что антимитохондриальная гепатоцитотоксическая сыворотка обладает более высокой органной специфичностью (Davis, Bollet, 1962; Родионов, Король, 1963), другие находят, что эта сыворотка обладает менее выраженной органной специфичностью, поскольку проявляет большее сродство к антигенам негомологичных органов (Спасокукоцкий и др., 1972).

Сравнительно малая изученность затронутых вопросов и их значение для дальнейшей разработки цитотоксических сывороток более целенаправленного действия побудили нас предпринять исследование по изучению органной специфичности иммунной сыворотки, полученной к микросомальной фракции клеток семенника (Барченко, Воробей, 1976).

В перекрестных серологических реакциях изучалась степень сродства этой сыворотки к антигенам гомологичных и негомологичных органов и полученные данные сравнивались с аналогичными показателями для цитотоксической сыворотки, полученной к цельной ткани семенника. Кроме того, было изучено сродство антимикросомальной, антитестикулярной цитотоксической сыворотки к ядерной и митохондриальной фракциям клеток семенника.

АТЦС к цельной ткани семенника получали путем иммунизации кроликов водно-солевым экстрактом ткани семенников крыс. Для получения АТЦС-мс кроликов иммунизировали выделенной путем фракционного центрифугирования по методу Menard и Purvis (1973) микросомальной фракцией клеток семенника крыс. Чистоту выделенной фракции контролировали на электрнно-микроскопических препаратах. Согласно полученным данным, выделенная микросомальная фракция содержала большое количество мембран, смыкающихся своими концами, и расположенных между ними микросом. Всего было получено и исследовано 9 серий АТЦС-мс с титрами 1 : 160, 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800 и 5 серий АТЦС с титрами 1 : 200, 1 : 320 и 1 : 800.

Титр антител в сыворотках животных после иммунизации и при постановке перекрестных серологических реакций определяли по тепловому варианту реакции связывания комплемента.

Специфичность антимикросомальной сыворотки к антигенам других внутриклеточных органелл изучали путем сравнения титра сыворотки с микросомальной фракцией с титрами такой же сыворотки с митохондриальной и ядерной фракциями клеток семенника крысы.

Ядерную фракцию клеток выделяли путем фракционного центрифугирования по методу Hogeboom и Schneider (1952) в модификации Dounce (1957) на рефрижераторной центрифуге К-24.

Митохондриальную фракцию клеток семенника выделяли путем фракционного центрифугирования по методу Schneider и Hogeboom (1950) в модификации Psychoyos и соавторов (1966).

В перекрестных серологических реакциях с различными антигенами были изучены иммунологические свойства двух цитотоксических сывороток — антитестикулярной цитотоксической сыворотки, полученной к цельной ткани семенника и антимикросомальной АТЦС, полученной к микросомальной фракции клеток семенника (АТЦСмс).


«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого



Агарков Г. Б. Нервный аппарат надпочечных желез. М., «Медицина», 1.964. 189 с. Барченко Л. I., Воробей А. I. Порiвняльна серологiчна характеристика антитестикулярноÏ та антимшросомноÏ антитестйкулярноÏ цитотоксичних сироваток. — Фiзiол. журн., 1976, 22, № 5, с. 598 — 603. Бейрах И. С.Рябов М. X. Опыт применения гетерогенных тестикулотоксических сывороток при некоторых функциональных расстройствах мужского полового аппарата….

Нацик В. I. Серолопчна характеристика антитестикулярних цитотоксичних сироваток, специфiчних для бугаш. — Фiзiол. журн., 1974, 20, № 5, с. 628 — 631. Нiщименко О. В. До питания про iмунологiчну активнiсть i специфiчнiсть iмунних цитотоксичних сироваток в реакцiях зв´язування комплемента. — Фiзiол. журн., 1969, 15, № 4, с. 546 — 549. Нiщименко О. В. Характеристика iмунолопчноÏ…

Abramoff P., Saunders J., Gasseling M. Т. Cytotoxicity of geterologous immune chicken serum to normal and neoplastic mouse tissues in culture. — J. Nat. Cancer Instit., 1961, 26, N 3, p. 585 — 599. Anigstein L.} McConnell K., Whitney D., Pappas P., Portman 0., Barnes W. Distribution of radioiodinatid aritiorgan antibodies in the injected rat….

Изучение серологической активности и специфичности фракций иммуноглобулинов IgM и IgG, выделенных из АТЦС

Многочисленными исследованиями установлено отсутствие параллелизма между серологической и цитотоксической активностью сывороток. Оказалось, что сыворотки с высокой серологической активностью слабо эффективны при введении их в организм, и, наоборот, сыворотки, характеризующиеся низким титром антител in vitro, часто обладали значительным цитотоксическим эффектом. По-видимому, эти различия связаны с наличием в сыворотках различных классов иммунных глобулинов и прежде всего IgM…

Анализ данных о серологической активности фракции IgG иммуноглобулинов АТЦС

Анализ данных о серологической активности фракции IgG иммуноглобулинов АТЦС в реакции потребления комплемента показал, что она была невысокой. До абсорбции фракции IgM в реакции с тканью семенника связывала 5,9±0,55 единиц комплемента, с другими органами комплементсвязывающая активность их была еще меньше. В реакции с тканью почек связывалось 3,5±0,15 единиц комплемента, с тканью печени — 2,4±0,18, селезенки…