10 февраля 2012

Изучение серологической активности и специфичности фракций иммуноглобулинов IgM и IgG, выделенных из АТЦС

Многочисленными исследованиями установлено отсутствие параллелизма между серологической и цитотоксической активностью сывороток. Оказалось, что сыворотки с высокой серологической активностью слабо эффективны при введении их в организм, и, наоборот, сыворотки, характеризующиеся низким титром антител in vitro, часто обладали значительным цитотоксическим эффектом. По-видимому, эти различия связаны с наличием в сыворотках различных классов иммунных глобулинов и прежде всего IgM с константой седиментации 19S и IgG с константой седиментации 7S.

В литературе остается не выясненным вопрос о природе IgM- и IgG-антител к тестикулярному антигену, которые образуются при введении его в организм животного-донора. Неизвестна также их серологическая и цитотоксическая активность. Поскольку АТЦС содержит гетерогенную смесь белков, то целесообразно выяснить, с какой фракцией иммуноглобулинов связана ее серологическая и цитотоксическая активность. Решение этого вопроса позволит использовать не цельные сыворотки, а отдельные фракции иммуноглобулинов, что, с одной стороны, повысит эффективность их применения в экспериментальных исследованиях и с лечебной целью, а с другой стороны, позволит избавить организм от введения балластных белков.

IgM- и IgG-фракции иммуноглобулинов АТЦС, специфичной для крыс, методом гельфильтрации с использованием сефадекса ζ-200 по методу Flodin и Killander (1962). Серологическую активность и специфичность этих фракций изучали путем постановки реакции потребления комплемента (РПК) по 50%-ному гемолизу методом Chudomel и соавторами (1957) в модификации В. Н. Федорича (1970) с семенником и другими органами крысы (почка, печень, селезенка, легкие, головной мозг).

Цитотоксическая активность сывороток и фракций IgM и IgG иммуноглобулинов изучалась с помощью цитотоксического теста по Gorer и Gorman (1964) в модификации Б. Д. Брондза (1964).

Результаты проведенных исследований (Нищименко, 1974; Ильчевич, Нищименко, 1975) показали, что неабсорбированные цельные АТЦС в реакции с тканью семенника связывали 21,5±0,55 единиц комплемента.

Количество единиц комплемента, связанного фракциями IgM и IgG, выделенными из АТЦС в РПК с гомологичным и негомологичными антигенами  Количество единиц комплемента, связанного фракциями IgM и IgG,
выделенными из АТЦС в РПК с гомологичным и негомологичными антигенами

I — сыворотка,
II — IgM,
III — IgG;

а — семенник (светлая часть —
количество единиц комплемента, связанного абсорбированной АТЦС, а также
выделенными из нее IgM и IgG с текстикулярным антигеном),
б — почка,
в —
печень,
г — селезенка,
д — легкие,
е — головной мозг.

С антигенами из других органов комплементсвязывающая активность сывороток была статистически достоверно меньше (Р < 0,001). Так, в реакции с тканью почек она связывала 10,9±0,37 единиц комплемента, с тканью печени — 8,7±0,37, селезенки — 9,7±0,18, легких — 5,8±0,18, головного мозга — 3,8±0,23 единиц комплемента. После абсорбции алкоголизированной тканью печени неспецифических антител

АТЦС в реакции потребления комплемента реагировала только с тестикулярным антигеном, причем ее комплементсвязывающая активность была почти в 1,2 раза меньше, чем у неабсорбированной сыворотки (16,5±0,22  единиц  комплемента).

«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого



Агарков Г. Б. Нервный аппарат надпочечных желез. М., «Медицина», 1.964. 189 с. Барченко Л. I., Воробей А. I. Порiвняльна серологiчна характеристика антитестикулярноÏ та антимшросомноÏ антитестйкулярноÏ цитотоксичних сироваток. — Фiзiол. журн., 1976, 22, № 5, с. 598 — 603. Бейрах И. С.Рябов М. X. Опыт применения гетерогенных тестикулотоксических сывороток при некоторых функциональных расстройствах мужского полового аппарата….

Нацик В. I. Серолопчна характеристика антитестикулярних цитотоксичних сироваток, специфiчних для бугаш. — Фiзiол. журн., 1974, 20, № 5, с. 628 — 631. Нiщименко О. В. До питания про iмунологiчну активнiсть i специфiчнiсть iмунних цитотоксичних сироваток в реакцiях зв´язування комплемента. — Фiзiол. журн., 1969, 15, № 4, с. 546 — 549. Нiщименко О. В. Характеристика iмунолопчноÏ…

Abramoff P., Saunders J., Gasseling M. Т. Cytotoxicity of geterologous immune chicken serum to normal and neoplastic mouse tissues in culture. — J. Nat. Cancer Instit., 1961, 26, N 3, p. 585 — 599. Anigstein L.} McConnell K., Whitney D., Pappas P., Portman 0., Barnes W. Distribution of radioiodinatid aritiorgan antibodies in the injected rat….

Анализ данных о серологической активности фракции IgG иммуноглобулинов АТЦС

Анализ данных о серологической активности фракции IgG иммуноглобулинов АТЦС в реакции потребления комплемента показал, что она была невысокой. До абсорбции фракции IgM в реакции с тканью семенника связывала 5,9±0,55 единиц комплемента, с другими органами комплементсвязывающая активность их была еще меньше. В реакции с тканью почек связывалось 3,5±0,15 единиц комплемента, с тканью печени — 2,4±0,18, селезенки…

Активность IgM в цитотоксическом тесте была незначительной. Цитотоксический индекс фракции IgM ;с клетками семенника составлял 0,28 ± 0,08. После удаления из сывороток неспецифических антител этот индекс снижался до, 0,13±0,05 (Р < 0,05). В цитотоксической реакции IgM реагировали и с клетками других органов: почек — 0,20 ± 0,04, печени — 0,18 ±0,04, селезенки — 0,19±0,06, легких…