Биологически активные вещества

Равновесные концентрации ДСМ и АНС в митохондриях клетки существенно зависят от величины суммы потенциалов на плазматической и митохондриальных мембранах (ϕ1+ ϕ2). Чтобы по флоуресценции ДСМ в митохондриях отдельных клеток однозначно судить, на какой именно мембране (на внешней или на митохондриальной) изменилась трансмембранная разность потенциалов, предлагается использовать две схемы инкубации клеток с флуоресцентным зондом и ксенобиотиком:…

Количественно оценить флуоресцентные ответы зонда в клетке при деэнергизации митохондрий можно, либо измеряя флуоресценцию в митохондриях на микроскопе-флуориметре, либо путем сканирования и денситометрии изображения клетки на фотопленке. По данным цитофлуорометрии, предварительная инкубация живых клеток (например, тетрахимены, лимфоцита) с разобщителем дыхательного фосфорилирования 2,4-динитрофенолом (в концентрации 1 мМ) приводит к снижению интенсивности флуоресценции ДСМ в митохондриях клеток…

Следующий уровень сложности модели — митохондрии в составе живой клетки. Тестирование состояния митохондрий в клетке может производиться методами флуоресцентного анализа, технологически хорошо совместимого с автоматизированной системой классификации. Митохондрии обладают собственной флуоресценцией, обусловленной остатками ароматических аминокислот в составе белков митохондрий, а также флавиновыми и пиридиновыми компонентами в их дыхательной цепи (Barenboim et al., 1969; Черногрядская и…

Контроль за влиянием ХС на митохондрии можно осуществлять на различных уровнях организации этих структур: на изолированных митохондриях в составе изолированных клеток, тканей, органных фрагментов и органов, наконец, на уровне целостных организмов при наличии экспериментальной техники, позволяющей «заглянуть» в клетки (например, с помощью контактной микроскопии). Во всех этих случаях контроль за жизнедеятельностью митохондрий может осуществляться по…

Общеизвестно, что митохондрии являются «силовыми станциями» живой клетки: именно они отвечают за выработку основной массы молекул АТФ во всех клетках человеческого организма (за исключением эритроцитов), и, следовательно, митохондрии отвечают за все энергоемкие процессы в клетке и организме: транспорт ионов и питательных веществ, биосинтез, механохимические явления, поддержание гомеостаза и т. п. Именно поэтому воздействие ХС на…

Л. А. Протозанова и др. (1981) исследовали влияние аминазина и крезоцина (производное феноксиуксусной кислоты) на время жизни спермиев морского ежа методами спектроскопии оптического смешения. В первом случае был обнаружен ингибирующий эффект, во втором — активирующий. Эти результаты были воспроизведены на сперме человека с качественно сходными результатами: сохраняется ингибирующий эффект первого препарата и активирующий второго при концентрациях,…

Распространенным методом для измерения распределения подвижных клеток по скоростям все чаще становятся методы спектроскопии оптического смешения, в которых используется эффект изменения частоты света, рассеянного на подвижном объекте (эффект Доплера). Источником света в этом случае обычно служит лазер. Сравительный обзор различных методов оценки подвижности сперматозоидов выполнен Г. М. Баренбоймом и Л. А. Протозановой (1985). Для биологических…

Выявление среди массива тестируемых ХС тех соединений, которые действуют ингибирующим или активирующим образом на сперматозоиды, представляет интерес по крайней мере для трех типов задач: найти ХС, опасные для человека, сельскохозяйственных животных и вообще всего живого мира, где половое размножение является доминирующим; это те ХС, которые каким-либо образом нарушают функциональные возможности сперматозоидов еще в процессе сперматогенеза…

Для иллюстрации применения предлагаемого способа отбора нейротропных веществ приведем результаты (смотрите таблицу ниже). Оценка нейротропной активности некоторых ХС на идентифицированных нейронах виноградной улитки Название Классификация известных ХС Интегральная оценка действия испытываемого ХС на идентифицированные нейроны виноградной улитки 1 2 3 Дифенилгидантоиннатрий Противосудорожное средство Вызывает общее торможение нервной системы, снимает коразоловые судороги Фенобарбитал Снотворное, обладает противосудорожным…

Совокупность идентифицированных нейронов виноградной улитки, используемая в качестве тест-объекта, включает четыре типа нервных клеток, отражающих все основные типы активности существующих в нервной системе клеток и коррелирующих с их функциональным значением: спонтанно неактивные нейроны — высокопороговые, наиболее устойчивые к воздействиям интегративные элементы нервной системы, выполняют командную функцию, определяют активность животного; регулярно активные нейроны — низкопороговые нейроны,…

Для повышения производительности и экономической ээффективности первичного отбора нейротропных веществ, а также возможности оценки механизма действия вещества в качестве тест-объекта используют совокупность идентифицированных нейронов виноградной улитки (Gr. Helix). При этом регистрируют влияние ХС на спонтанно неактивные, регулярно и нерегулярно активные, а также залповые нейроны, причем регистрацию электрических параметров проводят внутриклеточно (Балабан 1078; Balaban, 1979). Выбранный…

Богатые возможности для создания алгоритмов весьма детальных видов биологической активности представляет культура ганглиев моллюска. Принципиальная возможность экстраполяции данных, полученных на этой модели, на нервную систему высших животных и человека основана на близости или идентичности молекулярных рецепторов. В настоящее время не известно ни одного вещества, молекулярные механизмы взаимодействия которого с рецепторными структурами нервных клеток отличались бы…