20 февраля 2012

Изменения активности и распределения кислой фосфатазы в клетках эксплантатов семенника

Изменения активности и распределения кислой фосфатазы в клетках эксплантатов семенника после воздействия большой дозы АТЦС и в клетках эксплантатов яичника после воздействия АОЦС были однотипными. Уже через час появляется неравномерность в уровне активности кислой фосфатазы в клетках. В одних участках зоны роста количество мест активности фермента в клетках по сравнению с контрольными препаратами увеличивается, в других — наоборот, резко уменьшается. Однако при этом характер распределения фермента в клетке остается таким же, как в норме.

Через 3 ч после начала воздействия больших доз цитотоксических сывороток изменения в клетках семенника и яичника более выражены. В одних клетках кислая фосфатаза обнаруживается в крупных вакуолях, возникающих в цитоплазме клетки, в других наблюдается сплошная темно-коричневая окраска цитоплазмы.


Клетки зоны роста эксплантата семенника через 3 ч после воздействия большой дозы АТЦС

Клетки зоны роста эксплантата семенника через 3 ч после воздействия большой дозы АТЦС

Реакция на кислую фосфатазу по Гомори. Ок. 20 х об. 40.


Это свидетельствует о том, что гидролитический фермент больше не отграничен оболочками лизосом от окружающей цитоплазмы. Часть фермента диффундирует в окружающую среду, образуя вокруг клеток коричневатый ореол.

При электронно-микроскопическом исследовании в этот срок в цитоплазме клеток, особенно в эктоплазматической зоне, образуется большое количество крупных вакуолей размером до 1 мк и неправильной формы полостей, которые никогда не наблюдаются в нормальных клетках.


Клетка эксплантата семенника после воздействия большой дозы АТЦС

Клетка эксплантата семенника после воздействия большой дозы АТЦС

Образование вакуолей и полостей в эктоплазматической зоне клетки. Х 17500.


Разной формы и величины вакуоли отделены от остальной цитоплазмы хорошо различимой мембраной. Внутри оптически пустой вакуоли обычно содержится одно или два тельца различной электронной плотности, напоминающие по виду остатки различных внутриклеточных образований, которые можно наблюдать внутри лизосом.

Можно предположить, что такие вакуоли образуются при участии лизосом, тем более что характерные для интактных клеток лизосомы в таких участках обычно не наблюдаются.

Через 6 ч после начала воздействия цитотоксических сывороток кислая фосфатаза обнаруживается в клетках в очень незначительном количестве и распределена по клетке диффузно, определяя их слабо-коричневую окраску. Через 24 ч кислая фосфатаза в клетках уже не обнаруживается.

Важным для жизнедеятельности клетки органоидом являются митохондрии, в которых сосредоточены ферменты, участвующие в процессах превращения и накопления энергии в клетке. При электронно-микроскопическом исследовании клеток эксплантатов семенника, подвергнутых воздействию большой дозы АТЦС, наблюдается разная степень повреждения митохондрий. В начальной стадии отмечается вздутие крист митохондрий, затем митохондрии увеличиваются в объеме, вздуваются, кристы разрушаются и распадаются на отдельные фрагменты. Уже через 30 мин после начала действия сыворотки резко падает активность содержащегося в митохондриях фермента сукцинатдегидрогеназы и в дальнейшем он вообще не выявляется.

Кроме исследования морфологических изменений изучалось также влияние больших доз цитотоксических сывороток на функциональную способность клеток. Физиологическим показателем активней жизнедеятельности клеток являлось измерение скорости роста эксплантатов, которая определялась путем зарисовки эксплантатов под микроскопом (при увеличении ок. 3 X об. 3) с помощью рисовального аппарата и последующего планиметрического измерения зарисованных площадей.

На основании полученных цифровых данных вычислялся индекс скорости роста. Для получения средних цифровых данных индексов роста определялась скорость роста 30 — 35 эксплантатов. Для того чтобы легче было сравнивать данные различных опытов, определяли, какой процент составляет скорость роста подопытных эксплантатов к скорости роста контрольных эксплантатов, принятой за 100%.

«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого



Улезко-Строганова К. Я. Рост яичников in vitro. — Труды Центр, науч.-исслед. акушер.-гинекол. ин-та НКЗ СССР, 1935, 1, с. 58 — 66. Уманский Ю. А. Исследование накопления радиоактивных изотопов в опухолях при введении их в организм в составе противоопухолевых сывороток. — В кн.: Опыт применения радиоактивных изотопов в медицине. К., 1955, с. 100 — 104. Физиология…

Abramoff P. Saunders J., Gasseling М. Cytotoxicity of heterologous immune chicken serum to normal and neoplastic mouse tissues in culture. — J. Nat. Cancer Inst., 1961, 28, N 3, p. 585 — 599. Allen E. The oestrus eycle in the mouse. — Amer. J. Anat., 1922, 30, p. 297 — 312. Alloiteau G. Y. Effects…

Kay W. W., Whitehead R. The Role of Impurities and mixtures of isomers in the staining of rat by commercial sudans. — J. Pathol. Bact., 1941, 53, N 2, p. 279 — 284. Kobayashi Т., Sato H.§ Maruyama M.f Aral K., Takezawa S. Persistent estrus produced in rats by hypothalamic lesions. — Endocrinol. Japanica, 1959,…

Самборская Е. П. Влияние избытка аскорбиновой кислоты на функцию генеративных органов. Автореф. докт. дис. К., 1965. Селезнев Я. М. К нормальной и патологической физиологии яичника (экспериментальные гистологические исследования). Дис. СПб., 1891. Сердюков М. Г. Современный взгляд на функциональное значение овариального фолликула и его инкретов. — Клинич. медицина, 1928, № 19, с. 1270 — 1281. Серов…

Имшенецкая Л. Я. Экспериментально-клинические данные об эндокринных изменениях при крипторхизме. Автореф. канд. дис. К., 1970. Ирд Е. А., Маркарян Д. С. Экспериментальная гормонотерапия фолликулярных кист яичников у крыс — Проблемы эндокринологии и гормонотерапии, 1963, 9, № 5, с. 55 — 59. Йорданов Ж., Анастасова-Кръестева М., Хаджиолов Л. И., Бояджиева-Михайлова Л. Принос към експерименталната хистология на…