Установлено, что вирионная фосфатаза способна гидролизовать АТФ до АДФ → АМФ — аденозина, а ЦТФ и УТФ — до цитидина и уридина соответственно.
Среди нуклеотидов, которых около 2000 на одну вирусную частицу, идентифицированы АДФ, ЦТФ, дЦТФ, ГДФ, дАТФ (больше 100 молекул на вирион), ГМФ, УТФ, АМФ, АТФ, ТТФ, УДФ, дТМФ (50 — 100 молекул на вирион). В (вирионах вируса саркомы Рауса выявлены гексокиназа и лактатдегидротеназа, в них нет глюкозо-6-фосфатде-гидротеназы (Mizutani et al., 1971).
Сравнившая специфические активности каждого фермента в целом вирионе и очищенных ядрах, все ферменты можно разделить на две группы:
- ДНК-полимеразы, ДНК-лигаза и гексокиназа, которые обладают повышенной активностью в ядрах;
- тРНК-нуклеотидилтрансфераза, нуклеозидди-фосфатфосфотрансфераза, лактатдегидрогеназа и АТФаза, имеющие пониженную специфическую активность в ядрах, т. е. эти ферменты не ассоциированы с сердцевиной вириона, а являются частью оболочки.
Очищенные вирионы лейкоза мышей Раушера и миелобластоза птиц обладают протеинкиназной активностью и содержат белки, являющиеся субстратом для действия этого фермента (Tsiapalis, 1977).
Фосфорилирование белков значительно увеличивается, если в систему добавлять протамин. Фосфорилируются главным образом основные структурные полипептиды вириона, входящие в состав нуклеоида. После обработки нейраминидазой и фосфолипазой С вирионы вируса Раушера проявляют гемагглютинирующую активность, ассоциированную с гликопротеином, локализующимся, вероятно, на наружной мембране вириона и имеющим молекулярную массу 93 000.
Итак, в вирионах онкорнавирусов содержится весьма обширный набор белков, обладающих ферментативной активностью. Нельзя исключить, что некоторые ферментативные активности по аналогии с комплексом обратной транскриптазы обусловливаются одним и тем же белком. Предполагают, что не все вирионные ферменты кодируются вирусным геномом, а являются клеточными, включающимися в состав вириона при ассамблировании частиц в цитоплазме, либо адсорбируются на поверхности вирионов.
Вопрос о происхождении вирионных ферментов имеет принципиальное значение, и, вероятно, наиболее реальные пути его разрешения — это проведение исследований на ts-мутантах вирусов, имеющих мутационные повреждения определенного вирионного фермента.
Другим не менее важным аспектом, который также может быть уточнен на моделях ts-мутантов онкорнавирусов, является определение конкретной биологической функции и участия вирионных ферментов в репродукции вирусов.
Считают, что ферменты вирионов онкорнавирусов могут, по-видимому, обеспечивать все этапы репликации вирусного генома, в том числе синтез вирусной ДНК и встраивание этой двуспиральной вирус-специфической ДНК-копии в хромосому клетки. Вирионные ферменты могут, очевидно, участвовать в процессах рекомбинации и репарации.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко