Используя чувствительный радиоиммунный тест, Mizutani и Temin (1976) показали, что ревертазы вирусов саркомно-лейкозного комплекса птиц и группы ретикулоэндотелиоза, которые по данным молекулярной гибридизации неродственны, имеют некоторое антигенное сходство.
Перекрестные иммунологические реакции протекали и с клеточными ДНК-полимеразами. На этом основании авторы предполагают, что ревертазы онкорнавирусов обеих групп имеют клеточное происхождение.
Подробно охарактеризована ДНК-полимераза, ассоциированная с интерплазматическими частицами А-типа мышей (Kohno, Tanaka, 1977).
Уровень эндогенной и экзогенной активности пропорционален концентрации вирусного белка. Оптимум действия фермента при рН 7,3, концентрации NaCl 90 ммоль, ДТТ 3 — 4 ммоль, Mg2+ 2 — 3 ммоль. В эндогенной реакции Мn2+ в 2 раза менее эффективен, чем Mg2+, но в экзогенной реакции, катализируемой поли (рЦ): олиго (дГ), Мn2+ вообще неактивен.
Вирионная РНКаза Н представляет собой экзонуклеазу, осуществляющую деградацию РНК в РНК — ДНК-гибриде как от 5´-конца к З´-концу, так и в обратном направлении (Leis et al., 1976).
Одноцепочечную РНК, одно- и двухцепочечную ДНК, а также ДНК в составе РНК — ДНК-гибрида РНКаза Н не разрушает, т. е. она гидролизует рибонуклеотидную цепь во всех гибридных молекулах, за исключением (3Н-поли У) : (оголи дА).
Продуктом реакции являются олигонуклеотиды длиной в 2 — 8 нуклеотидов. Эти данные позволяют предполагать, что РНКаза Н играет существенную роль в процессе освобождения ДНК из РНК — ДНК-гибридов в полимеразной реакции. Затем одноцепочечная ДНК может использоваться для синтеза двухцепочечной ДНК.
Согласно другому предположению, образующаяся молекула, состоящая из РНК — ДНК-гибрида и освобожденных коротких фрагментов одноцепочечной ДНК, инкорпорируется в хромосому клетки, где РНКаза Н ядра (эндо-нуклеаза) разрушает внутренние последовательности РНК в РНК — ДНК-гибриде с последующей репарацией ДНК и образованием дуплекса ДНК.
Так как ДНК-продукт на матрице 70S-PHK составляет 4 — 12S, то описываемая модель исключает необходимость интеграции многих мелких фрагментов вирусных ДНК с ДНК хромосом клетки.
Однако поскольку в настоящее время нет твердых доказательств в пользу того, что вирионные РНКазные Н-активности не являются контаминацией со стороны клеток хозяина, к предполагаемому участию РНКазы Н в процессах интеграции вирусного генома с клеточным следует относиться пока весьма осторожно.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко