Смотрите — Принципы приготовления растворимых испытательных форм ХС
В реальных ситуациях, по-видимому, могут использоваться все три подхода или их комбинации. Например, описанный выше метод создания короткоживущих коллоидных растворов путем перевода ХС из органического растворителя в воду может быть успешно дополнен введением сыворотки крови или альбуминов в этот водный коллоидный раствор, которые, образуя раствор в воде, заберут «на себя» плохо растворимое в воде ХС.
Применение каждого из названных подходов или их комбинации связано с тщательной оценкой влияния таких подходов на само вещество и на биологический тест-объект.
Смешанные растворители, например, могут повредить биологический тест-объект; ультразвуковое диспергирование может нарушить структуру вещества, взаимодействие коллоидных растворов с биополимерами, субклеточными структурами и клетками вообще не изучено, а результаты такого взаимодействия могут резко отличаться от реакции тест-объекта на истинный раствор.
Различного рода солюбилизаторы, даже естественные носители ХС, например альбумины, могут быть несовместимы с биообъектом, влиять на его структуру или функциональную активность.
Все растворы, получаемые любым из названных выше способов, подлежат стандартизации. Особенно важна стандартизация для растворов с применением солюбилизаторов и коллоидных растворов, имеющих ограниченное время жизни.
Важным показателем стандартности этого случая может быть дисперсность раствора — распределение частиц по размерам. Для солюбилизаторов вводятся свои стандарты, определяющие условия их применения.
Наряду с названными выше физико-химическими методами для работы с нерастворимыми веществами может быть использована чисто биологическая методика — применение биологических тест-объектов, способных поглотить микрочастицу нерастворимого вещества.
Таким объектом являются, например, одноклеточные простейшие организмы (парамеция, тетрахимена), которые могут использоваться как биодатчики. Если ХС, нерастворимое в воде, например, антрацен, после измельчения смешать с крахмальными микрогранулами, которые станут носителем ХС, и диспергировать эту смесь в физиологическом растворе или другой среде, пригодной для обитания, например парамеций, то через некоторое время в парамециях, помещенных в эту среду, можно будет обнаружить антрацен по его флуоресценции методами люминесцентного анализа.
В некоторых случаях часто непонятным для нас образом клетка умеет перерабатывать подобные вещества, переводя их в растворимую форму.
В целом этот подход может быть реализован для ограниченного числа моделей, веществ и задач. Общая схема приготовления растворов и взвесей ХС дана на рисунке ниже.
Классификация ХС по исходному состоянию и растворимости применительно
к задачам биологических испытаний (по Л. И. Флейдерману)
«Биологически активные вещества»,
Г.М.Баренбойм, А.Г.Маленков