Используя в качестве антигена внутриклеточные структуры (микросомы, ядра, митохондрии), можно получить цитотоксические сыворотки с различными биологическими свойствами, отличающиеся по своему действию на отдельные процессы жизнедеятельности клетки (Зайчик, 1969, 1972; Колобаев, Павлов, 1976).
Показано, что сыворотки, выработанные к отдельным клеточным органоидам оказывали более избирательное влияние, чем сыворотка, полученная к цельной ткани (Петрунь и др., 1970; Зайчик, Вереникина. 1972).
Менее однозначные результаты были получены при изучении органной специфичности цитотоксических сывороток, полученных, к внутриклеточным структурам. Одни авторы на основании серологических исследований пришли к выводу, что антимитохондриальная гепатоцитотоксическая сыворотка обладает более высокой органной специфичностью (Davis, Bollet, 1962; Родионов, Король, 1963), другие находят, что эта сыворотка обладает менее выраженной органной специфичностью, поскольку проявляет большее сродство к антигенам негомологичных органов (Спасокукоцкий и др., 1972).
Сравнительно малая изученность затронутых вопросов и их значение для дальнейшей разработки цитотоксических сывороток более целенаправленного действия побудили нас предпринять исследование по изучению органной специфичности иммунной сыворотки, полученной к микросомальной фракции клеток семенника (Барченко, Воробей, 1976).
В перекрестных серологических реакциях изучалась степень сродства этой сыворотки к антигенам гомологичных и негомологичных органов и полученные данные сравнивались с аналогичными показателями для цитотоксической сыворотки, полученной к цельной ткани семенника. Кроме того, было изучено сродство антимикросомальной, антитестикулярной цитотоксической сыворотки к ядерной и митохондриальной фракциям клеток семенника.
АТЦС к цельной ткани семенника получали путем иммунизации кроликов водно-солевым экстрактом ткани семенников крыс. Для получения АТЦС-мс кроликов иммунизировали выделенной путем фракционного центрифугирования по методу Menard и Purvis (1973) микросомальной фракцией клеток семенника крыс. Чистоту выделенной фракции контролировали на электрнно-микроскопических препаратах. Согласно полученным данным, выделенная микросомальная фракция содержала большое количество мембран, смыкающихся своими концами, и расположенных между ними микросом. Всего было получено и исследовано 9 серий АТЦС-мс с титрами 1 : 160, 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800 и 5 серий АТЦС с титрами 1 : 200, 1 : 320 и 1 : 800.
Титр антител в сыворотках животных после иммунизации и при постановке перекрестных серологических реакций определяли по тепловому варианту реакции связывания комплемента.
Специфичность антимикросомальной сыворотки к антигенам других внутриклеточных органелл изучали путем сравнения титра сыворотки с микросомальной фракцией с титрами такой же сыворотки с митохондриальной и ядерной фракциями клеток семенника крысы.
Ядерную фракцию клеток выделяли путем фракционного центрифугирования по методу Hogeboom и Schneider (1952) в модификации Dounce (1957) на рефрижераторной центрифуге К-24.
Митохондриальную фракцию клеток семенника выделяли путем фракционного центрифугирования по методу Schneider и Hogeboom (1950) в модификации Psychoyos и соавторов (1966).
В перекрестных серологических реакциях с различными антигенами были изучены иммунологические свойства двух цитотоксических сывороток — антитестикулярной цитотоксической сыворотки, полученной к цельной ткани семенника и антимикросомальной АТЦС, полученной к микросомальной фракции клеток семенника (АТЦСмс).
«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого