После окончания электрофореза пластинки перекладывают в специальную камеру для окраски, заливают красящую смесь и инкубируют в термостате 2 ч при 37 °С. Затем сливают смесь и несколько раз тщательно промывают агаровые пластинки дистиллированной водой.
Сушку пластинок производят следующим образом: вырезанные по форме пластинки полоски хроматографической бумаги осторожно накладывают на агар, не сдвигая его. На чистую фильтровальную бумагу кладут пластинки хроматографической бумагой вниз и оставляют сохнуть до следующего дня. Затем хроматографическую бумагу открепляют, осторожно протирают стекло и производят количественное определение изоферментов, фотоэлектроколориметрическим методом, разработанным Ю. А. Юрковым (1968).
Для электрофореза используют концентрированную мочу, предварительно диализированную. Очень удобен и прост метод концентрирования мочи в целлофановых мешочках под вентилятором, предложенный Ю. А. Юрковым (1967). После того как в мешочке останется 0,1 мл мочи, последнюю собирают микропипеткой в узкодонную центрифужную пробирку, где она сохраняется до проведения электрофореза (хранить следует в холодильнике при температуре 4 °С не более 2 сут, после чего активность катодных фракций практически теряется).
В норме общая активность ЛДГ в моче здоровых детей от 3 до 14 лет колеблется от 2 до 18 единиц [Wroblevski W., 1961], составляя в среднем 9,76 ±0,72. Спектр изоaферментов здоровых детей характеризуется наличием в моче ЛДГ-1 и ЛДГ-2 с преобладанием ЛДГ-1.
При пиелонефрите, независимо от его формы, при обострении процесса в моче у большинства детей спектр изоферментов характеризуется появлением катодных фракций (от 3 до 5 фракций). При этом определяется зависимость спектра от формы пиелонефрита, длительности заболевания и степени распространенности процесса в почках.
Так, у детей с выраженной клинической картиной необструктивного пиелонефрита при давности заболевания до 3 лет отмечается увеличение активности катодных фракций, причем более значительное при двустороннем процессе.
Самые резкие изменения обнаруживаются у больных с обструктивными формами пиелонефрита: у всех детей в моче определяется 5 фракций, причем преобладает активность катодных фракций. Преимущественное содержание анодных фракций (ЛДГ-1 и ЛДГ-2) при наличии всех 5 фракций и незначительная активность характерны. Для детей с наименьшей степенью поражения почек [Пугачева В. И., 1972].
«Детская урология», Н.А. Лопаткин