Показатель повреждения нейтрофилов (тест ППН по Фрадкину)
Первоначально этот тест был предложен В. А. Фрадкиным (1962) для диагностики туберкулиновой аллергии, но позднее ряд исследователей с успехом использовали его для диагностики как инфекционной, так и неинфекционной аллергии.
На высокую корреляцию показателей кожных проб и теста ППН указывают данные, полученные нашей сотрудницей с аллергенами грибов [Яблокова Ф. М., 1983].
Сущность метода состоит в усилении амебоидной активности нейтрофилов крови сенсибилизированных лиц при контакте со специфическим аллергеном. В настоящее время выпускают ряд инфекционных аллергенов-диагностикумов специально для теста ППН.
Методика. В две химически чистые пробирки вносят по 0,02 мл 5% раствора цитрата натрия (контроль) и 0,02 мл аллергена с цитратом. Для каждой опытной и контрольной пробирки набирают микропипеткой по 0,08 мл крови из пальца. Пробирки осторожно встряхивают (для перемешивания) и ставят в термостат на 2 ч при 38 °С. Готовят мазки, которые обрабатывают на гликоген. Мазки фиксируют 96% спиртом в течение 10 мин. Перед использованием к спирту добавляют 40% раствор нейтрального формалина (на каждые 10 мл спирта 1 мл формалина).
Лабораторная диагностика включает также реакцию бластной трансформации лейкоцитов (БТЛ), тест розеткообразующих клеток (РОК), которые можно использовать в диагностике лекарственной, бактериальной и грибковой аллергии.
Реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ)
Используется в клинической диагностике с 60-х годов. Феномен основан на трансформации лимфоцитов в бласты при контакте с аллергеном. Лимфоциты увеличиваются в размерах, в них усиливается синтез РНК и ДНК, белка, появляются митозы. В педиатрической практике пользуются модификацией РБТЛ, связанной с накоплением лимфоцитов. Для выявления повышенной специфической чувствительности нужен как можно более очищенный аллерген, чтобы избежать неспецифического влияния примесей. Обычно РБТЛ ставят с антигенами простейших, грибов, бактерий, вирусов, а также используют при медикаментозной аллергии.
При постановке реакции необходимо брать несколько разведений аллергена, так как при низких или высоких концентрациях можно получить извращенные данные.
Для правильной оценки результатов РБТЛ параллельно с аллергеном ставят реакции на неспецифический митоген — ФГА и с разводящей жидкостью. Результаты специфической и неспецифической РБТЛ могут дополнять друг друга. Очень важна стандартизация условий культивирования клеток.
Инструментальные методы исследования (аспирационная биопсия, электрогастрография, рентгеновский метод), используемые преимущественно для диагностики пищевой аллергии, не нашли широкого применения в педиатрической практике из-за травматичности.
В заключение необходимо подчеркнуть, что ни один из перечисленных методов не может иметь самостоятельного решающего значения в диагностике аллергии. Только сочетание данных клинических и лабораторных методов выявляет причинно-значимый аллерген у каждого больного.
«Аллергические болезни у детей», проф. М.Я.Студеникин