Обнаружена интеграция ДНК SV40 в геном клетки при литической инфекции в форме отдельных фрагментов с субгеномной длиной.
Такие интегрированные молекулы появляются через день после заражения и способны к репликации. Впервые линейная ковалентная интеграция выявляется в то время, когда определяется синтез Т-антигена (Tuxler, 1977).
Только несколько копий вирусного генома интегрируется между 10 ч и 18 ч инфекции, т. е. когда начинается репликация клеточной и вирусной ДНК. Frenkel (1977) предположил, что часть нуклеотидов, обнаруживающихся при деградации вирусной ДНК1 SV40 в процессе продуктивной инфекции, используется клеткой для синтеза клеточной ДНК.
Указанные нуклеотиды образуют последовательности, специфичные для клеточной ДНК, а не для вирусной, и, таким образом, обнаружение в клеточной ДНК «вирусных» нуклеотидов не является отражением процесса интеграции вирусных фрагментов в клеточный геном.
Исследование интегрированной формы аденовирусной ДНК А2, появляющейся на ранней стадии при продуктивной инфекции, также позволило выявить, что она по величине соответствует большинству фрагментов, которые образуются при действии рестриктазы из Е. coli RI на вирусный геном.
Наряду с этим часть фрагментов, содержащих последовательности ДНК вируса А2, имели иную величину, чем фрагменты, полученные при помощи Е. coli RI (Schik et al., 1976). Полагают, что такие фрагменты, помимо последовательностей ДНК вируса А2, содержат последовательности клеточной ДНК.
Представлены данные, свидетельствующие о том, что в продуктивно инфицированных клетках вирусов простого герпеса 1-го типа имеет место интеграция ДНК HSVI с Хромосомальной ДНК (Biegeleisen, Rush, 1976). Такие клетки, содержащие вирусные геномы в своих хромосомах (до 50 копий в расчете на одну клетку), представляют потенциальный источник как трансформационных, так и лизогенных процессов.
Следовательно, интегративный тип взаимодействия с клеткой, по-видимому, вообще характерен для онковирусов.
Обнаружение интеграции при литической инфекции сразу же стимулировало исследования, направленные на выявление возможной специфики этого процесса при опухолевой трансформации клеток.
Принципиально важно было выяснить специфичность места интеграции при трансформации, т. е. определить точки разрыва клеточной ДНК, необходимые для последующего встраивания вирусного генома.
Не менее существенным было уточнение и точек разрыва вирусной ДНК при литической инфекции и трансформации, поскольку специфичность разрыва в последующем определяет и характер транскрибируемых вирусспецифических мРНК- Важно также идентифицировать инициирующий механизм интеграции — наличие гена (или генов) в составе вирусного генома, ответственного за интеграцию при трансформации и литической инфекции.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко