Другим геном, функция которого, вероятно, необходима для появления и сохранения характерных для трансформированных клеток свойств плазматической поверхностной мембраны, является ген ts-3.
Продукт этого гена, еще окончательно не идентифицированный, в результате изменений, которые он вызывает на клеточной мембране, по-видимому, нарушает контактное ингибирование синтеза клеточной ДНК и изменяет типоингибицию и агглютинацию лектинами. Функция третьего вирусного гена, идентифицированная на мутантах по кругу хозяев, также, вероятно, связана с изменениями плазматической мембраны клеток, на что указывает прямая взаимосвязь экспрессии этого вирусного гена и трансформации клеток.
На ts-мутантах пяти комплементационных групп показано, что продукт гена A SV40 необходим для индукции активности клеточной тимидинкиназы (Postel, Levin, 1976). Мутация в гене D, кодирующем синтез структурного белка вириона, лишь косвенно препятствует этому процессу, так как исключает возможность деструкции белков вириона на стадии, предшествующей транскрипции вирусной ДНК.
Ts-мутанты онкорнавирусов птиц разделены на три группы: дефектные по репликации, дефектные по трансформации и координированные, т. е. неспособные при непермиссивной температуре ни к репликации, ни к трансформации. Основная трудность при изучении этих мутантов обусловлена генетическим фоном клеток-хозяина, т. е. необходимостью получения генетически гомогенных систем, свободных от экспрессии информации эндогенных онкорнавирусов.
Наиболее приемлемым для этих целей оказались предварительно клонируемые куриные клетки, в которых продукция вирусных частиц полностью отсутствует, а экспрессии gs-антигенов либо нет, либо она протекает в весьма незначительной степени.
Клетки японских перепелок и уток не пригодны для анализа ts-мутантов из-за чрезвычайно низкой способности ASV к репликации в этих клетках. Эксперименты на ts-мутантах ASV, имеющих дефект на стадиях инициации и поддержания состояния трансформации, позволили Hakomori и соавт. (1977) прийти к заключению, согласно которому трансформированный фенотип ассоциирован со снижением уровня и синтеза гематозида, а также снижением количества высших сиалозилгликолипидов.
В мембранной фракции фибробластов кур обнаружено вещество, связывающее глюкозу, причем в трансформированных фибробластах его содержится в 2 1/2 раза больше, чем в нормальных клетках (Lee, Lipmarm, 1977). Реверсия к нормальному фенотипу фибробластов, трансформированных ts-мутантом RSV при непермиссивных температурах, приводит к снижению содержания этого вещества.
Добавление очищенного фактора, связывающего глюкозу, к нормальным фибробластам увеличивало потребление ими глюкозы в 7 раз (по сравнению с контролем).
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко