Показано, что РНКаза Н из вирионов онкорнавирусов птиц может гидролизовать полиУ, полиА и полиА : полиУ.
В отличие от РНКазы Н из Е. coli представляющей собой эндонуклеазу, продуцирующую олигонуклеотиды с 3´-фосфатным и З´-гидроксильным концами, продуктом деградации вирусного фермента являются главным образом динуклеотиды.
Тетрануклеотиды же являются основным продуктом действия клеточной РНКазы Н (Leis et al., 1976).
У большинства онкорнавирусов РНКаза Н ассоциирована с обратной транскриптазой. Вместе с тем, у некоторых вирусов ассоциации РНКазы Н с полимеразой обнаружить не удалось. Ревертаза и РНКаза Н имеют одинаковые потребности в ионах металлов, сульфгидрильных реагентах и оптимуме рН.
Оптимальная концентрация для действия фермента Mg2+ равна 10 — 12 ммоль, Мn2+ — 0,3 ммоль. Активность РНКазы прямо зависит от присутствия полидезоксинуклеотида и не зависит от наличия дезоксинуклеотидов. Антитела к полимеразе AMV нейтрализуют активность обоих ферментов. В то же время антитела к РНКазе Н из Е. coli не подавляют активность РНКазы Н из озирионов AMV.
Очищенный ферментативный комплекс обратной транскриптазы и РНКазы Н из вирионов В-типа MTV имеет коэффициент седиментации 5S, что соответствует молекулярной массе около 100 000 (Dion et al., 1977). РНКаза Н MTV также специфически гидролизует только нить РНК в составе РНК — ДНК-гибрида и по всем свойствам, описанным выше, не отличается от РНКазы Н вирусов С-типа птиц и млекопитающих.
Из вируса миелобластоза птиц выделен белок, который восстанавливает уровень транскрипции РНК, в 8 раз повышает синтез ДНК и вытесняет нити ДНК с РНК в гибридном ДНК — РНК-комплексе.
Этот белок, вероятно, являющийся специфичным для полимеразы AMV, отделяется от вирионной обратной транскриптазы при хроматографии на фосфоцеллюлозе. Данный термочувствительный недиализуемый фактор может блокировать реакции, катализируемые РНК из фагов Qβ и f2.
В вирионах RSV, разрушенных нонидетом Р-40, обнаружены полинуклеотидлигазная активность (ДНК-лигаза) и ДНК-нуклеаза.
Полинуклеотидлигаза, как известно, соединяет разорванные фосфодиэфирные связи в одной из нитей двуспиральной ДНК. Продуктом эндонуклеазной активности являются 5-инозин- и цитозинмоно-фосфаты (ИМФ и ЦМФ).
Активность возрастает при разрушении вириона и снижается при нагревании разрушенного вируса саркомы Рауса. Лигазная активность также обнаруживается в разрушенном вирионе RSV и не требует присутствия экзогенного АТФ.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко