Одними из самых лабильных органоидов клетки являются митохондрии, которые первыми реагируют на различные воздействия на клетку. И их изменения всегда связаны с изменением функциональной активности клетки.
В митохондриях сосредоточен целый набор ферментов, участвующих в превращении промежуточных продуктов в цикле Кребса. Поэтому мы решили использовать гистохимический метод выявления активности сукцинатдегидрогеназы по методу Нахласа.
В этих исследованиях наряду с обычными цитотоксическими сыворотками, полученными по отношению к ткани целого органа, была испытана антимитохондриальная цитотоксическая сыворотка, полученная по отношению к изолированным митохондриям семенника крысы. Места активности фермента видны в клетке в виде темно-сиреневых гранул формазана и соответствуют местам локализации митохондрий.
Кроме сукцинатдегидрогеназы была исследована активность фермента кислой фосфатазы, локализованного в лизосомах, и фермента тиаминпирофосфатазы, локализованного в комплексе аппарата Гольджи. Кислая фосфатаза определялась по методу Гомори, а тиаминпирофосфатаза — по методу Найду и Пратт.
Проведенные исследования показали, что уже через 30 мин после контакта клеток с малой дозой специфичной для них цитотоксической сыворотки (0,05 — 0,01% к количеству питательной среды) снижается активность фермента сукцинатдегидрогеназы по сравнению с контрольными препаратами. Этот процесс развивается очень неравномерно.
В зоне роста одного и того же эксплантата могут встречаться целые участки клеток как с очень пониженным содержанием фермента (в клетке видно лишь небольшое количество мелких пылевидных гранул), так и с нормальным, а в некоторых случаях — даже повышенным его содержанием.
Однако в основном в подопытных эксплантатах преобладают клетки с пониженной активностью фермента. При действии антимитохондриальной цитотоксической сыворотки угнетение активности фермента выражено еще больше.
Угнетение активности фермента сравнительно кратковременно и сохраняется до 3 ч для цитотоксических сывороток, полученных по отношению к цельной ткани, и до 6 ч при действии антимитохондриальной АТЦС. Через 6 — 12 ч происходит полное восстановление уровня активности сукцинатдегидрогеназы.
Приблизительно по такой же схеме происходило изменение реакции клеток на витальный краситель: в интервале времени от 30 мин до 3 ч наблюдалось ослабление процесса гранулярного отложения красителя, гранулы были меньше по размеру и очень слабо окрашены. В отличие от сукцинатдегидрогеназы количество кислой фосфатазы в клетках подопытных эксплантатов через 30 мин, 1 ч и 3 ч было повышенным. Особенно большое количество гранул фермента сосредотачивалось в одном участке клетки возле ядра, в зоне расположения аппарата Гольджи.
Активность тиаминпирофосфатазы была понижена.
Таким образом, в течение первых трех часов после контакта клеток с малыми дозами специфичной для них цитотоксической сыворотки повышается активность кислой фосфатазы в отдельных участках клетки и наблюдается кратковременное, нерезко выраженное угнетение процессов жизнедеятельности клетки в ходе развития реакции антиген — антитело.
«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого