Метод культуры тканей был использован для изучения действия АТЦС и АОЦС на эксплантаты семенников и яичников экспериментальных животных (Барченко, 1964, 1965а, б, 1968а, б, 1969).
Ткани семенников и яичников белых крыс культивировали во флаконах Карреля на подложке из целлофана, которая облегчала работу с культурами во время пассирования и гистологической обработки. В состав питательной среды входили раствор Тироде, плазма крови гуся, телячий эмбриональный экстракт и лошадиная сыворотка.
Цитотоксические сыворотки вводили в жидкую питательную среду, покрывающую эксплантаты, и поэтому дозировка сывороток рассчитывалась в процентах к общему количеству питательной среды во флаконе. В тех случаях, когда испытывались разные дозы, цитотоксическая сыворотка разводилась непосредственно перед употреблением раствором Тироде 1 : 2, 1 : 4, 1 : 10, 1 : 100, 1 : 500.
Поскольку цитотоксические сыворотки, специфичные к тканям крыс, получали в результате иммунизации кроликов, то в питательную среду контрольных культур добавляли в соответствующей дозе сыворотку крови неиммунизированного кролика.
В ориентировочных опытах по подбору угнетающих и стимулирующих доз АТЦС и АОЦС были испытаны следующие дозы цитотоксических сывороток (в % к количеству питательной среды): 20; 10; 5; 25; 0,5; 0,2,5; 0,05; 0,01. Установлено, что дозы 5, 10 и 20% сыворотки оказывают на культуры соответствующих тканей сильное угнетающее действие. Поэтому в дальнейших исследованиях мы употребляли обычно дозу 20%, как дающую наиболее постоянный и закономерный ингибирующий эффект.
Наиболее оптимальными стимулирующими дозами были 0,05 и 0,01 % сыворотки к количеству питательной среды.
Морфологический анализ зоны роста культивируемых нами эксплантатов семенника показал, что самой значительной составной частью зоны роста являются клетки полигональной или слегка вытянутой формы со слабо окрашенной гомогенной цитоплазмой без четкого разделения на эндо- и эктоплазму, с большими, светлыми, овальными ядрами с одним-двумя ядрышками. Эти клетки растут обычно в виде сплошных пластов.
Такой характер роста очень похож по внешнему виду на рост в культурах эпителия, однако отличается от последнего некоторыми функциональными и морфологическими особенностями.
В меньшем количестве в зоне роста встречаются вытянутые веретеновидные клетки, соответствующие по внешнему виду и характеру роста соединительнотканным клеткам.
«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого