При продуктивной аденовирусной инфекции, как и в случае инфекции паповавирусами, осуществляется синтез двух видов РНК — ранних и поздних. Синтез ранней вирусспецифической РНК аденовирусов продолжается на поздних этапах инфекции, а синтез поздней РНК на ранних стадиях практически отсутствует.
На физической карте генома А2 идентифицированы два гена, кодирующих синтез вирусассоциированной 5,5S РНК длиной в 156 нуклеотидов. Эта РНК обнаруживается в цитоплазме, не связанной с рибосомами, поскольку высокая степень спирализации, по-видимому, препятствует выполнению ею функции мРНК.
Ген I расположен вокруг положения 30 ед. карты и расщепляется рестриктазой BamHI. Ген II локализован на той же нити ДНК А2 справа от гена I, что соответствует положению от 30,3 до 32,2 ед. карты. Расположение генов I и II вблизи 5´-конца области ДНК, соответствующей генам стабильных поздних мРНК, ответственных за синтез структурных вирусных белков, может предопределять участие этой ДНК в регуляции аденовирусной экспрессии на поздних стадиях инфекции.
В экспериментах на Ts-мутантах вируса А5 получены данные, указывающие на то, что, по-видимому, акт репликации вирусной ДНК не требуется для транскрипции поздних вирусных мРНК в клетках, если однажды репликация вирусной ДНК уже началась (Carter, Ginsberg, 1976). На поздних стадиях инфекции в транскрипционном комплексе вируса А2 обнаруживалось 30 — 45% неинтегрированной в хромосомы клеток HeLa ДНК А2, находящейся в ядрах (Wilchelm et al., 1976).
Во фракциях комплекса с низкими константами седиментации выявлена РНК-полимеразная активность, как в форме РНК-полимеразы, связанной с ДНК, так и в форме свободной РНК-полимеразы: 95% РНК-полимеразной активности определялось РНК-полимеразой В-типа (ингибируемой низкими концентрациями а-аманитина) и 5% — РНК-полимеразой С-типа (ингибируемой только высокими концентрациями α-аманитина).
В опытах по РНК — ДНК-гибридизации синтезированная этим комплексом РНК на 90% гибридизировалась с ДНК А2, причем почти исключительно с ее 1-цепью. In vivo в этот период инфекции также транскрибируется почти исключительно 1-цепь ДНК А2.
РНК, синтезируемая комплексом in vitro, характеризовалась значительной гетерогенностью по величинам констант седиментации (6 — 28S). Предполагают, что in vitro процесс транскрипции вирусной ДНК осуществляется в несколько раз медленнее, чем in vivo, в составе ядер зараженных аденовирусом клеток.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко