Активность аденилатциклазы в трансформированных клетках значительно понижена, что нарушает синтез цАМФ из АТФ.
Аденилатциклаза локализуется в плазматических мембранах, структуры и функции которых наиболее сильно изменены в неопластически трансформированных клетках.
В то же время активность фосфодиэстеразы цАМФ в таких клетках не отличается от нормы. Следовательно, трансформированные клетки способны поддерживать распад цАМФ на уровне, свойственном нормальным клеткам. Таким образом, нарушения согласованной деятельности двух основных ферментов метаболизма цАМФ в процессе опухолевой трансформации лежат в основе глубоких изменений обмена этого универсального регулятора клеточных функций.
Проведено сравнительное исследование стимулирующей способности пролиферации гуанилатциклазы, фосфодиэстеразы цГМФ и уровня цГМФ в нормальных и трансформированных фибробластах в культуре (Nesbitt et al., 1976).
Стимулирования гуанилатциклазы фактором роста фибробластов не обнаружено. Активность гуанилатциклазы была низкой в течение фазы логарифмического роста и возрастала при замедлении роста с увеличением насыщенности культур.
В клетках, трансформированных Ki — MSV, активность гуанилатциклазы не проявлялась. Трансформация клеток почки крысы Ki — MSV, Н — MSV и RSV (штамм Шмидта — Руппина) приводила к снижению активности гуанилатциклазы в клетках.
После трансформации фибробластов BaLB/3Т3 онкорнавирусами (Mo — MSV, H — MSV, Ki — MSV или SV40), метилхолантреном или после спонтанной трансформации активность гуанилатциклазы также уменьшалась, но уровень ее еще можно было измерить.
Активность фосфодиэстеразы цГМФ несколько возрастала при вступлении клеток в стационарную фазу. В двух клонах почечных клеток крысы, трансформированных Ki — MSV, активность этого фермента не выявлялась и снижалась в третьем клоне клеток.
Трансформация почечных клеток Мо — MSV и RSV почти не влияла на активность фосфодиэстеразы. Обнаружено, что снижение активности фосфодиэстеразы цГМФ в процессе трансформации не было вызвано потерей активатора этого фермента.
Уровень цГМФ в трансформированных онковирусами клетках почки крысы оказался значительно ниже, чем в нормальных клетках в насыщенной культуре.
Это связано со значительным снижением активности гуанилатциклазы после трансформации клеток. Следовательно, представленные факты не согласуются с мнением о том, что цГМФ способствует росту фибробластоподобных клеток.
Участие цАМФ в неопластическом превращении клеток в последнее время связывают с функционированием микроканальцевых структур — характерного фиброзного каркаса клеток эукариотов.
Основными функциями микроканальцев являются обеспечение формы клетки, клеточной поверхности, движения хромосом при митозе, внутриклеточного транспорта. Установлено, что эти функции контролируются цАМФ.
Тубулинмономерная единица микроканальцевых элементов служит субстратом для цАМФ-зависимой протеинкиназы. Препараты тубулина обладают киназной активностью, стимулируемой цАМФ. В частности, обнаружено, что антимитотический алкалоид винбластин, связывающийся с тубулином, блокирует антипролиферирующий эффект цАМФ в трансформированных клетках.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко