Основная масса вирусспецифических полипептидов синтезируется на мембраносвязанных полирибосомах, а часть находится во фракции свободных полирибосом, где и происходит их синтез. Методом иммунопреципитации пептидов удалось определить размеры этих полирибосом — 350S.
Эта величина свидетельствует о том, что вирусные мРНК транслируются на полирибосомах, состоящих из 12 монорибосом. На полирибосомах такого размера могут транслироваться мРНК с молекулярной массой около 3Х106, что собственно соответствует размерам субъединиц вирионной РНК.
Установлено, что вначале синтезируются полипептиды, являющиеся предшественниками gs-антигенов. Так, в клетках, зараженных AMV, таким предшественником является полипептид с молекулярной массой 76 000 (Рr76), синтез которого начинается через 3 ч после инфекции.
Низкий уровень его синтеза поддерживается до 7-го часа, а затем между 7-м и 9-м часом происходит 5-кратное возрастание синтеза и этот уровень сохраняется до 24-го часа. В клетках, обработанных до или во время инфекции актиномицином D или цитозинарабинозидом, синтез предшественника наблюдается и на ранних этапах инфекции (3 — 7 ч). Количество Рr76, синтезированного в присутствии этих ингибиторов синтеза ДНК, практически не отличалось от такого в необработанных клетках.
На основании полученных данных можно предполагать, что проникшая в клетку вирусная РНК функционирует в качестве мРНК для Рr76.
Расщепление этого предшественника начинается с С-концевых последовательностей, первым отделяется белок с молекулярной массой 14 000, затем из оставшегося полипептида последовательно образуются белки с молекулярными массами 28 000, 17 000 и 10 000 (Gallis et al., 1976). Такая строгая последовательность в созревании вирусных белков свидетельствует о том, что специфические протеиназы начинают расщепление предшественника только после завершения процесса трансляции.
При анализе экспрессии генов онкорнавирусов птиц на уровне белкового продукта показано, что все исследованные клетки (gs+ и gs—) синтезируют вирусные р27, р19 и р15 (Halpern et al., 1975). Соотношение вирусных белков в клетке примерно такое же, как и в вирионе, с той лишь разницей, что количество р15 несколько больше.
В клетках, способных поддерживать репликацию RSV (gs—he и gs+he), кроме указанных белков синтезируется гликопротеид вирусной оболочки — gp85, a в клетках, лишенных «хелперной» активности, gp85 не продуцируется. В нормальных куриных сhf+-клетках, не продуцирующих вирусных частиц, количество gp85 колеблется от 0,06 до 0,1% от содержания тотального клеточного белка.
При инфекции RSV количество gp85 резко возрастало. Gupta и соавт. (1975) определили концентрацию р27, р 19 и р 15 в незараженных и продуктивно трансформированных RSV клетках. В нормальных клетках количество каждого из белков не превышало 10 нг на 1 мг тотального клеточного белка, тогда как в зараженных клетках наблюдалось резкое возрастание уровня р27, р19 и р15 до 520, 1400 и 650 нг/мг соответственно.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко