Последовательности, обогащенные полиадениловой кислотой (поли-А), в настоящее время привлекают к себе пристальное внимание многих исследовательских коллективов.
Интерес этот вполне оправдан, так как ковалентно связанные поли-А-фрагменты обнаружены в таких важных классах РНК, как клеточных информационных и их ядерных предшественниках, а также в вирусспецифических и некоторых вирионных РНК тех вирусов, РНК которых выполняют функцию информационной, т. е. транслируются (или частично транслируются).
Универсальное распространение поли-А-блоков в транслируемых мРНК клеточного и вирусного происхождения указывает на их важную роль в процессе трансляции, однако какова эта роль, пока неизвестно. Вместе с тем следует отметить наличие четкой корреляции между присутствием поли-А-фрагментов в геномных РНК разных вирусов, их матричными функциями и инфекционностью.
Из таких вирусов в отдельную группу можно выделить онкорнавирусы, в вирионных РНК которых содержится 0,6 — 5% полиадениловой кислоты.
Молекулярная масса этих поли-А-сегментов составляет 3 — 6,8Х104 или 1Х105, что соответствует 100 — 200 остаткам адениловой кислоты. Иными словами, учитывая содержание поли-А и молекулярную массу вирусной РНК, на вирион в некоторых случаях может приходиться 3 — 4 фрагмента поли-А в 100 — 200 нуклеотидах с коэффициентом седиментации 3 — 4S.
Эти сегменты поли-А ковалентно связаны со всеми субъединицами вирусной РНК, что формирует регулярную структуру генома, состоящего из 2 — 4 субъединиц. Каждая из таких субъединиц может содержать последовательности поли-А, локализованные в области 3´-ОН-конца молекул 35S РНК, имеющего последовательность… Г(ЦУ)А190А ОН.
Кроме фрагментов поли-А, расположенных на 3´- конце молекул, обнаружены короткие обогащенные адениновыми остатками последовательности, входящие, вероятно, в состав двуспиральных «шпилек» с симметричным нуклеотидным составом.
Показано, что 60 — 70S РНК-комплекс состоит из 30 — 40S РНК субъединиц, содержащих поли-А (65%), и субъединиц, в которых поли-А отсутствует (около 30%).
Гетерополимерные участки этих двух типов 30 — 40S-субъединиц имеют идентичный олигонуклеотидный состав и полную гомологию (Joseph, Ihle, 1977).
Два олигонуклеотида, устойчивые к РНКазе Т1, по которым отличаются РНК RSV штамм Прага от делеционного мутанта, дефектного по способности трансформировать фибробласты, ассоциированы с 11S-фрагментом РНК RSV, обогащенным поли-А.
Следовательно, последовательности РНК, связанные с неопластической трансформацией фибробластов (онкоген), локализованы в пределах 5 — 10% от 3´-конца молекулы РНК RSV.
Предполагают, что большие блоки тголи-А, не связанные с клеточными РНК, имеют прямое отношение к онкогенезу, поскольку в ядре инфицированных клеток они нарушают регуляторные механизмы, следствием чего и является неопластическая конверсия.
Кроме того, считают, что сегменты поли-А могут выполнять одну из следующих функций: регулировать активность полимеразы, осуществляющей синтез ДНК с 70S РНК, т. е. быть местом инициации РНК-зависимого синтеза ДНК или синтеза вирусных субъединиц с вирусной ДНК; участвовать в сборке 60 — 705-генома из субъединиц 30 — 40S-PHK путем образования двойной спирали с участками, богатыми уридиловой кислотой (поли-У); транслироваться в полилизин, который в свою очередь может выполнять регуляторные функции при транскрипции РНК, а также служить сигналом при созревании вирусных белков и сборке вирусных частиц.
Наконец, нельзя исключить, что фрагменты поли-А могут обеспечивать своеобразную маскировку вирусных РНК, синтезированных в ядре с интегрированной вирусной ДНК, под собственные мРНК клетки.
«Механизмы вирусного онкогенеза»,
А.И.Агеенко