Схематическое изображение синтеза А и В цепей инсулина бактерий (Е. coli) с помощью методики рекомбинации ДНК (по Riggs A., Itakura К., Am. J. Hum. Genet, 1979, 31, 351). чить кДНК (ДНК«копию») для проинсулина, либо химический синтез меньших фрагментов ДНК, кодирующих А и В цепи инсулина человека.
Синтетические гены затем объединяются с геном, в норме экспрессированном в клетке Е. coli (например, геном пенициллиназы илигалактозидазы), что обеспечивает эффективную транскрипцию и трансляцию, т. е. образование стабильного белкапредшественника, или (в случае периплазматического белка, такого, как пенициллиназа) способствует транспорту продукта из клетки.
Векторами, применяющимися для внесения чужеродной и бактериальной ДНК в бактериальную клетку, служат либо бактериофаги, либо плазмиды. Бактерия, содержащая плазмиду, транскрибирует свой собственный ген, равно, как и внедренную последовательность, продуцируя тем самым нужный полипептид. Тот факт, что последователь ность эукариотической ДНК удается клонировать и экспрессировать в прокариотических (бактериальных) клетках, может найти наиболее быстрое применение в области использования бактериального синтеза для продукции инсулина человека, нужного для лечения больных с инсулинозависимым диабетом.
Такая технология тем самым может обеспечить создание альтернативного источника инсулина и в конце концов вытеснить современные способы получения гормона, заключающиеся в экстракции свиных и бычьих поджелудочных желез.
«Эндокринология и метаболизм», Ф.Фелиг, Д.Бакстер