Блок 5. Классификация ХС по повреждающему действию на клетки крови и элементы иммунной системы | |||
Функциональное назначение | Определение концентрационно-временных эффектов повреждающего действия ХС на эритроциты, лимфоциты, глобулины, реакцию антигенантитело и бласттрансформацию лимфоцитов | ||
Методы и их технологические особенности | В этом блоке оценки повреждений в элементах иммунной системы используют три группы методов: 1) биофизические методы, позволяющие определять проницаемость мембран клеток, резистентность, размеры клеток, величину заряда путем регистрации спектрально-оптических и электрических параметров суспензий эритроцитов и лимфоцитов; 2) иммунофлуоресцентный метод, позволяющий определять характеристики взаимодействия антигенантитело путем регистрации флуоресценции, и метод определения денатурационной устойчивости глобулинов путем регистрации флуоресценции; цитологический метод для определения характеристик бласттрансформации лимфоцитов путем регистрации флуоресценции клеток, включающих в синтезы люминесцентномеченые предшественники белков (в настоящее время метод требует проведения специальных исследований для выбора оптимальной технологии) | ||
Основные характеристики блока | |||
Объект | Измеряемая характеристика |
Измеряемая зависимость от структуры (класса) и дозы ХС | Техника |
Эритроциты | Устойчивость к гемолизу | Зависимость измеряемых характеристик | Автоматизированный суспензионный модуль |
Лимфоциты | Спектры флуоресценции (собственной и с зондами) | Проточный спектрофлуориметр | |
Глобулины | |||
Сыворотка крови | |||
Альбумины | |||
Блок 6. Классификация ХС по повреждающему действию на элементы нервной системы | |||
Функциональное назначение | Определение концентрационно-временных эффектов ХС при их действии на ЦНС улитки, нервное волокно лягушки и синаптосомы мозга крыс | ||
Особенности тестов | Исследование реакций ЦНС улитки и нервного волокна проводят стандартными электрофизиологическими методами, позволяющими регистрировать величину мембранного потенциала, спонтанные и вызванные потенциалы действия, проводимость мембран и т. д. В настоящее время имеются все основания к переводу микроэлектродной техники на методы оптической регистрации, поскольку существует большой набор мембранных потенциально-чувствительных люминесцентных зондов. Синаптосомы представляют собой суспензию контактных мембран, когда пресинаптическая и постсинаптическая мембраны образуют замкнутые пузырьки, контактирующие через синаптическую щель. Такую суспензию помещают в проточную камеру, перфузируемую специальными растворами, куда добавляют ХС; определение различных параметров ведут прямо на суспензии и в протоке методами люминесцентной микроскопии |
||
Основные характеристики блока | |||
Объект | Измеряемая характеристика |
Измеряемая зависимость от структуры (класса) и дозы ХС | Техника |
Нейроны виноградной улитки | Мембранный потенциал | Концентрационно-временные зависимости измеряемых характеристик | Электрофизиологический микроэлектродный комплекс |
Нервное волокно лягушки | Потенциалы действия | ||
Синаптосомы мозга крыс | Проводимость мембран | Проточный флуоресцентный микроскоп | |
Спектрально-оптические характеристики мембран |
«Биологически активные вещества»,
Г.М.Баренбойм, А.Г.Маленков