| Блок 2. Классификация ХС по тканевой проницаемости | |||
| Функциональное назначение | Определение способности испытуемых веществ проникать через тканевые барьеры. (Степень токсичности вещества, обладающего потенциальным повреждающим действием и легко проникающего через тканевые барьеры, существенно возрастает.) | ||
| Методы и их технологические особенности | Используется модуль для определения проницаемости испытуемых веществ для кожи и стенки кишечника. Операционный блок такого модуля представляет собой измерительную ячейку, герметично разделенную образцом ткани на две половинки. Испытуемый раствор вносят в одну из половинок ячейки, инкубируют и определяют количества вещества, прошедшего через тканевый барьер, спектрально-оптическими методами или по действию на биодатчики, которые реагируют на минимальные концентрации вещества в блоке генерализованной реакции биологических объектов | ||
| Основные характеристики блока | |||
| Объект | Измеряемая характеристика |
Измеряемая зависимость от структуры (класса) и дозы ХС | Техника |
| Кожа лягушки | Спектрально-оптические характеристики проникающего ХС. Собственная флуоресценция и размеры клеток — биологических датчиков | Зависимость измеряемых характеристик от времени (при дозе вещества, вызывающего максимальный биологический эффект в блоке генерализованной реакции на тестируемый объект) | Автоматизированный барьерный модуль |
| Стенка желудка крысы | |||
| Стенка тонкого кишечника крысы | |||
| Блок 3. Классификация ХС по повреждающему действию на элементы генетической системы (ДНК-тропность и мутагенность) | |||
| Функциональное назначение | Определение способности испытуемых веществ быть тропными к ДНК, влиять на синтез ДНК, вызывать мутации | ||
| Методы и их технологические особенности | Используется способность бактерий, дрожжей и простейших водорослей изменять показатели своей жизнедеятельности под действием ХС, способных связываться с ДНК, влиять на синтез ДНК, вызывать мутации. Из всех возможных показателей жизнедеятельности выбраны те, которые сравнительно легко поддаются измерениям методами оптического анализа: рост клеток, изменение формы, продуцирование веществ, обладающих способностью к флуоресценции, или ферментов, способных производить вещества такого типа из исходных химических соединений, не обладающих способностью к флуоресценции. Наряду с этим в блоке применяются традиционные методы оценки мутагенности, использующие тест-объекты всех уровней сложности, кроме животных | ||
| Основные характеристики блока | |||
| Объект | Измеряемая характеристика |
Измеряемая зависимость от структуры (класса) и дозы ХС | Техника |
| Бактерии (Е. coli Rec, мутанты, тест на ДНК-тропность в культурах клеток, дефектных по пострепликативной и (или) рекомбинационной репарации) | Рост клеток, тестируемый по светорассеянию, оптическому поглощению рН-индикатора, флуоресценции зонда (оливомицина, количественно связанного с ДНК) | Зависимость светорассеяния клеток, оптического поглощения рН-индикатора, флуоресценции зонда | Проточный флуоресцентно-абсорбционный микроскоп |
| Дрожжи (сахаромицеты, штамм, меняющий свои размеры под действием мутагенов) | Изменение распределения клеток по форме и размерам при химическом мутагенезе | Зависимость светорассеяния клеток (изменения распределения клеток по размерам) | Система проточного лазерного фотометра светорассеяния с амплитудным анализатором |
| Дрожжи (сахаромицеты, штамм, меняющий продуцирование экзогенного фермента — кислой фосфатазы под действием мутагенов) | Изменение флуоресценции реагента 4-метилумбеллиферона (МУ) или других аналогичных веществ под действием экзогенной фосфатазы | Зависимость интенсивности флуоресценции 4-метилумбеллиферона или других аналогичных веществ | Проточный флуоресцентно-абсорбционный микроскоп |
| * Указаны только оригинальные (для оценки мутагенности) тесты, отличающиеся высокой технологичностью по отношению к автоматизации. Традиционные тесты и система таких тестов, официально рекомендованная для оценки мутагенности лекарств, перечислены в соответствующей главе. | |||
«Биологически активные вещества»,
Г.М.Баренбойм, А.Г.Маленков