Обычно в практических лабораториях пользуются дисками, выпускаемыми промышленностью. Диски эти готовят из определенных сортов бумаги, а концентрации антибиотиков подбирают таким образом, чтобы диаметр зон задержки роста чувствительных тест-микробов равнялся для всех антибиотиков 28—32 мм. Поскольку в настоящее время промышленностью выпускаются диски еще не со всеми антибиотиками, их можно приготовить и непосредственно в лаборатории, используя для этого бумагу, хорошо впитывающую жидкость (фильтровальная бумага ГОСТ 6722-65). Диски диаметром 6—8 мм стерилизуют сухим жаром 1 ч при 100° или в автоклаве, а затем пропитывают раствором антибиотика.
Диски диаметром 10 мм абсорбируют 0,015 мл раствора, а содержание антибиотика в диске должно составлять для:
| пенициллина (в том числе оксациллина, метициллина, ампнциллина) | 10 мкг (16 ЕД) |
| карбенициллина | 100 мкг |
| эритромицина, олеандомицина, линкомицина | 15 мкг |
| тетрациклина | 30 мкг |
| стрептомицина | 30 мкг |
| левомицетина | 30 мкг |
| канамицина, мономицина, гентамицина | 30 мкг |
| полимиксина | 15 мкг |
| ванкомицина, ристомицина | 30 мкг |
Пропитанные растворами антибиотиков диски высушивают в течение 4 ч при температуре 40°. Приготовленные диски хранят в стерильных пенициллиновых флаконах с соответствующими этикетками.
Хранение дисков
Применять изготовленные в лаборатории диски можно в течение 6 мес, диски с пенициллином — не более 1 мес. Допускается хранение влажных дисков (в холодильнике, в плотно закупоренных флаконах), но срок годности этих дисков меньше, чем сухих.
Вместо дисков при определении чувствительности микробов методом диффузии могут быть использованы цилиндрики (фарфоровые или металлические), в которые заливают растворы антибиотиков в необходимых концентрациях.
Метод канавки для определения чувствительности микробов к антибиотикам
В Англии до настоящего времени применяют предложенный Флемингом метод канавки. Для определения чувствительности микробов к антибиотикам этим методом в агаровой чашке вырезают полоску агара, а затем засевают штрихом перпендикулярно к канавке испытуемые штаммы микробов. Канавка заполняется растопленным и охлажденным до 55—60° агаром, содержащим определенные концентрации антибиотика. Благодаря диффузии антибиотика в питательную среду вблизи канавки происходит подавление роста чувствительных штаммов микроорганизмов.
«Справочник по антибиотикам», С.М.Навашин, И.П.Фомина