1 марта 2012

Активность кислой фосфатазы в срезах ткани семенников

Мы изучали активность кислой фосфатазы в срезах ткани семенников половозрелых крыс по методу Gomori (1941), приведенному в руководстве Э. Пирса (1952). Метод основан на образовании осадка фосфорнокислого свинца. Исследования показали, что кислая фосфатаза обнаруживается как в клетках сперматогенного эпителия, так и в интерстициальной ткани.

В одних канальцах более интенсивная гистохимическая реакция отмечается по периферии канальцев, в слое клеток Сертоли, в других — в слое дифференцированных клеток — сперматозоидов. Активность кислой фосфатазы в интерстициальной ткани в некоторых участках высокая, что свидетельствует о разном функциональном состоянии как клеток сперматогенного эпителия, так и клеток Лейдига.

Полученные нами данные о морфофункциональном состоянии семенников половозрелых крыс без введения сыворотки помогли дать оценку результатам действия АТЦС. Литература, касающаяся изучения действия АТЦС на половые железы животных, весьма немногочисленна. Еще в 1926 г. Н. В. Колпиков на нескольких кроликах показал, что большие дозы АТЦС вызывают атрофию герминативного эпителия семенных канальцев, что ведет к угасанию полового инстинкта и потере способности к оплодотворению.

Н. Г. Беленький (1940) установил, что большие дозы АТЦС, специфичной к семенникам петушков, угнетают половую функцию. По мнению автора, этот эффект может быть использован для рационального откорма птиц.

Угнетающее действие больших доз АТЦС на семенники крыс также показано Chowdhury и соавторами (1961), Е. Д. Генис (1963), Ю. А. Спасокукоцким (1964), Eyquem и другими (1967). Однако никто из указанных авторов не изучал действие сыворотки в длительной динамике с использованием широкого диапазона гистологических, гистохимических и морфометрических методик, а также не проводил исследования с другими сыворотками, взятыми в качестве контроля.

Нами показано (Зеленская, 1964, 1967, 1976), что большие дозы АТЦС, специфической к семенникам половозрелых крыс, вводимые внутривенно на протяжении пяти дней из расчета по 0,25 см3 цельной сыворотки на 100 г веса тела на инъекцию, вызывают следующие деструктивные изменения в семенниках. Через час после окончания введения сыворотки при исследовании препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, определяется пропитывание соединительной ткани белковой жидкостью. Стенка семенных канальцев рыхлая, контуры ее нечеткие.

В некоторых канальцах возле крупных сосудов отмечается перитубулярный отек и отслоение клеточных элементов от базальной мембраны. В сосудах видно слущивание эндотелиальных клеток, пропитывание стенки белковой жидкостью, набухание ядер мышечных клеток.

Протоплазма мышечных клеток сосудов вакуолизирована. Таким образом, все изменения, обнаруживаемые через час, сводятся к гидропическому набуханию клеток и волокон межканальцевой соединительной ткани, стенок сосудов и перитубулярному отеку семенных канальцев с отслоением клеточных элементов от базальной мембраны.

Со стороны липидов изменения не выявлены. АЦС и нормальная кроличья сыворотка, введенные в тех же дозах, через час после окончания курса инъекций вызывают некоторое пропитывание стенки сосуда и окружающей соединительной ткани белковой жидкостью. Изменения со стороны липидов не были выявлены.

Через три дня межканальцевая соединительная ткань в основном гомогенно пропитана белковыми массами.


Семенник самца 5 месяцев через 3 суток после внутривенного введения больших доз АТЦС

Семенник самца 5 месяцев через 3 суток после внутривенного введения больших доз АТЦС

Отек межканальцевой соединительной ткани и переполнение сосудов кровью с пропитыванием стенки сосуда белковыми массами.
Клетки сперматогенного эпителия на разных стадиях гибели.
Окраска гематоксилин-эозином. Ок.10 X об. 10.


Однако в некоторых местах вблизи крупных магистральных сосудов в межканальцевой соединительной ткани видна пролиферация клеток. Клетки светлые, распределены по 2—3 цепочкой. Особенно много пролиферирующих клеток в тех участках, где отмечается рассасывание белковой жидкости.

Стенки семенных канальцев также отечны. Более значительно отек выражен вблизи крупных сосудов. Что касается клеток Сертоли, то в одних канальцах ядра клеток с нормальным содержанием хроматина, а в клетках, расположенных вблизи сосудов, хроматин ядра разрыхлен, клетки вакуолизированы, с неровными контурами цитоплазмы.

Сперматогонии в отдельных канальцах также отечны, ядра содержат небольшое количество хроматина, цитоплазма клеток вакуолизирована, контуры ее нечеткие, лизированные по периферии, что приводит к снижению объема клеток.

Морфометрические показатели структуры семенника молодых крыс пост действия больших доз АТЦС

Дни исследования, сутки Объем сперматогоний Объем сперматоцит Высота сперматогенного эпителия Диаметр канальцев
% к показателям интактных крыс, принятым за 100%
3-й 60,82 67,86 93,18 100,38
10-е 77,48 73,57 97,72 97,32
21-е 70,08 59,45 90,90 98,47
45-е 28,28 57,65 111,36 79,7

Объем клеток определяли по формуле шара (Хесин, 1967).

«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого



Abramoff P. Saunders J., Gasseling М. Cytotoxicity of heterologous immune chicken serum to normal and neoplastic mouse tissues in culture. — J. Nat. Cancer Inst., 1961, 28, N 3, p. 585 — 599. Allen E. The oestrus eycle in the mouse. — Amer. J. Anat., 1922, 30, p. 297 — 312. Alloiteau G. Y. Effects…

Kay W. W., Whitehead R. The Role of Impurities and mixtures of isomers in the staining of rat by commercial sudans. — J. Pathol. Bact., 1941, 53, N 2, p. 279 — 284. Kobayashi Т., Sato H.§ Maruyama M.f Aral K., Takezawa S. Persistent estrus produced in rats by hypothalamic lesions. — Endocrinol. Japanica, 1959,…

Улезко-Строганова К. Я. Рост яичников in vitro. — Труды Центр, науч.-исслед. акушер.-гинекол. ин-та НКЗ СССР, 1935, 1, с. 58 — 66. Уманский Ю. А. Исследование накопления радиоактивных изотопов в опухолях при введении их в организм в составе противоопухолевых сывороток. — В кн.: Опыт применения радиоактивных изотопов в медицине. К., 1955, с. 100 — 104. Физиология…

Самборская Е. П. Влияние избытка аскорбиновой кислоты на функцию генеративных органов. Автореф. докт. дис. К., 1965. Селезнев Я. М. К нормальной и патологической физиологии яичника (экспериментальные гистологические исследования). Дис. СПб., 1891. Сердюков М. Г. Современный взгляд на функциональное значение овариального фолликула и его инкретов. — Клинич. медицина, 1928, № 19, с. 1270 — 1281. Серов…

Имшенецкая Л. Я. Экспериментально-клинические данные об эндокринных изменениях при крипторхизме. Автореф. канд. дис. К., 1970. Ирд Е. А., Маркарян Д. С. Экспериментальная гормонотерапия фолликулярных кист яичников у крыс — Проблемы эндокринологии и гормонотерапии, 1963, 9, № 5, с. 55 — 59. Йорданов Ж., Анастасова-Кръестева М., Хаджиолов Л. И., Бояджиева-Михайлова Л. Принос към експерименталната хистология на…