1 марта 2012

Активность кислой фосфатазы в срезах ткани семенников

Мы изучали активность кислой фосфатазы в срезах ткани семенников половозрелых крыс по методу Gomori (1941), приведенному в руководстве Э. Пирса (1952). Метод основан на образовании осадка фосфорнокислого свинца. Исследования показали, что кислая фосфатаза обнаруживается как в клетках сперматогенного эпителия, так и в интерстициальной ткани.

В одних канальцах более интенсивная гистохимическая реакция отмечается по периферии канальцев, в слое клеток Сертоли, в других — в слое дифференцированных клеток — сперматозоидов. Активность кислой фосфатазы в интерстициальной ткани в некоторых участках высокая, что свидетельствует о разном функциональном состоянии как клеток сперматогенного эпителия, так и клеток Лейдига.

Полученные нами данные о морфофункциональном состоянии семенников половозрелых крыс без введения сыворотки помогли дать оценку результатам действия АТЦС. Литература, касающаяся изучения действия АТЦС на половые железы животных, весьма немногочисленна. Еще в 1926 г. Н. В. Колпиков на нескольких кроликах показал, что большие дозы АТЦС вызывают атрофию герминативного эпителия семенных канальцев, что ведет к угасанию полового инстинкта и потере способности к оплодотворению.

Н. Г. Беленький (1940) установил, что большие дозы АТЦС, специфичной к семенникам петушков, угнетают половую функцию. По мнению автора, этот эффект может быть использован для рационального откорма птиц.

Угнетающее действие больших доз АТЦС на семенники крыс также показано Chowdhury и соавторами (1961), Е. Д. Генис (1963), Ю. А. Спасокукоцким (1964), Eyquem и другими (1967). Однако никто из указанных авторов не изучал действие сыворотки в длительной динамике с использованием широкого диапазона гистологических, гистохимических и морфометрических методик, а также не проводил исследования с другими сыворотками, взятыми в качестве контроля.

Нами показано (Зеленская, 1964, 1967, 1976), что большие дозы АТЦС, специфической к семенникам половозрелых крыс, вводимые внутривенно на протяжении пяти дней из расчета по 0,25 см3 цельной сыворотки на 100 г веса тела на инъекцию, вызывают следующие деструктивные изменения в семенниках. Через час после окончания введения сыворотки при исследовании препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, определяется пропитывание соединительной ткани белковой жидкостью. Стенка семенных канальцев рыхлая, контуры ее нечеткие.

В некоторых канальцах возле крупных сосудов отмечается перитубулярный отек и отслоение клеточных элементов от базальной мембраны. В сосудах видно слущивание эндотелиальных клеток, пропитывание стенки белковой жидкостью, набухание ядер мышечных клеток.

Протоплазма мышечных клеток сосудов вакуолизирована. Таким образом, все изменения, обнаруживаемые через час, сводятся к гидропическому набуханию клеток и волокон межканальцевой соединительной ткани, стенок сосудов и перитубулярному отеку семенных канальцев с отслоением клеточных элементов от базальной мембраны.

Со стороны липидов изменения не выявлены. АЦС и нормальная кроличья сыворотка, введенные в тех же дозах, через час после окончания курса инъекций вызывают некоторое пропитывание стенки сосуда и окружающей соединительной ткани белковой жидкостью. Изменения со стороны липидов не были выявлены.

Через три дня межканальцевая соединительная ткань в основном гомогенно пропитана белковыми массами.


Семенник самца 5 месяцев через 3 суток после внутривенного введения больших доз АТЦС

Семенник самца 5 месяцев через 3 суток после внутривенного введения больших доз АТЦС

Отек межканальцевой соединительной ткани и переполнение сосудов кровью с пропитыванием стенки сосуда белковыми массами.
Клетки сперматогенного эпителия на разных стадиях гибели.
Окраска гематоксилин-эозином. Ок.10 X об. 10.


Однако в некоторых местах вблизи крупных магистральных сосудов в межканальцевой соединительной ткани видна пролиферация клеток. Клетки светлые, распределены по 2—3 цепочкой. Особенно много пролиферирующих клеток в тех участках, где отмечается рассасывание белковой жидкости.

Стенки семенных канальцев также отечны. Более значительно отек выражен вблизи крупных сосудов. Что касается клеток Сертоли, то в одних канальцах ядра клеток с нормальным содержанием хроматина, а в клетках, расположенных вблизи сосудов, хроматин ядра разрыхлен, клетки вакуолизированы, с неровными контурами цитоплазмы.

Сперматогонии в отдельных канальцах также отечны, ядра содержат небольшое количество хроматина, цитоплазма клеток вакуолизирована, контуры ее нечеткие, лизированные по периферии, что приводит к снижению объема клеток.

Морфометрические показатели структуры семенника молодых крыс пост действия больших доз АТЦС

Дни исследования, сутки Объем сперматогоний Объем сперматоцит Высота сперматогенного эпителия Диаметр канальцев
% к показателям интактных крыс, принятым за 100%
3-й 60,82 67,86 93,18 100,38
10-е 77,48 73,57 97,72 97,32
21-е 70,08 59,45 90,90 98,47
45-е 28,28 57,65 111,36 79,7

Объем клеток определяли по формуле шара (Хесин, 1967).

«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого



Улезко-Строганова К. Я. Рост яичников in vitro. — Труды Центр, науч.-исслед. акушер.-гинекол. ин-та НКЗ СССР, 1935, 1, с. 58 — 66. Уманский Ю. А. Исследование накопления радиоактивных изотопов в опухолях при введении их в организм в составе противоопухолевых сывороток. — В кн.: Опыт применения радиоактивных изотопов в медицине. К., 1955, с. 100 — 104. Физиология…

Abramoff P. Saunders J., Gasseling М. Cytotoxicity of heterologous immune chicken serum to normal and neoplastic mouse tissues in culture. — J. Nat. Cancer Inst., 1961, 28, N 3, p. 585 — 599. Allen E. The oestrus eycle in the mouse. — Amer. J. Anat., 1922, 30, p. 297 — 312. Alloiteau G. Y. Effects…

Kay W. W., Whitehead R. The Role of Impurities and mixtures of isomers in the staining of rat by commercial sudans. — J. Pathol. Bact., 1941, 53, N 2, p. 279 — 284. Kobayashi Т., Sato H.§ Maruyama M.f Aral K., Takezawa S. Persistent estrus produced in rats by hypothalamic lesions. — Endocrinol. Japanica, 1959,…

Самборская Е. П. Влияние избытка аскорбиновой кислоты на функцию генеративных органов. Автореф. докт. дис. К., 1965. Селезнев Я. М. К нормальной и патологической физиологии яичника (экспериментальные гистологические исследования). Дис. СПб., 1891. Сердюков М. Г. Современный взгляд на функциональное значение овариального фолликула и его инкретов. — Клинич. медицина, 1928, № 19, с. 1270 — 1281. Серов…

Макаров П. В. Развитие половых клеток. — В кн.: Основы цитологии. М., 1953, с. 452 — 471. Мамамтавришвили Д. Г. О некоторых принципиальных вопросах бесплодного брака. — В кн.: Бесплодный брак. Тбилиси, 1960, с. 405 — 416. Марокко И. Н. Активность некоторых лизосомальных ферментов в печени и в плазме крови при острой анафилаксии. — В…