Получение антитестикулярной и антиовариальной цитотоксических сывороток и определение их специфичности
В экспериментальных исследованиях использовались АТЦС и АОЦС, специфичные соответственно к ткани семенников и яичников белых крыс. При проведении лабораторно-клинических исследований были использованы аналогичные сыворотки, специфичные к ткани семенников и яичников человека, получившие название «протестикулин» и «прооварин».
Цитотоксические сыворотки для экспериментальных животных получали путем иммунизации кроликов водносолевым экстрактом из ткани семенников или яичников белых крыс. Для иммунизации использовались кролики породы шиншилла в возрасте 2 — 3 лет весом 2,5 — 3 кг.
Используемые для иммунизации семенники и яичники крыс извлекали с соблюдением условий стерильности. Семенник освобождали от наружной белковой оболочки и крупных сосудов, а яичники тщательно очищали от жировой клетчатки и взвешивали на стерильном часовом стекле. Ткани измельчали ножницами, затем растирали в ступке с кварцевым песком, суспендировали в физиологическом растворе и центрифугировали в течение 10 — 15 мин при 1000 об/мин. Надосадочную жидкость фильтровали через четыре слоя марли и использовали для иммунизации.
Иммунизацию проводили нисходящими дозами антигена.
Для получения АТЦС кроликов иммунизировали экстрактом, приготовленным из 2; 1,5 и 1 г ткани семенника по экспрессному методу Ю. А. Спасокукоцкого (1964), трехкратно с интервалами между инъекциями один день. Для получения АОЦС проводилась пятикратная иммунизация кроликов экстрактами, приготовленными из 300, 250, 200, 150 и 100 мг ткани яичников крыс, с двухдневными интервалами между инъекциями.
На 7-й день после последнего введения антигена у кроликов брали кровь для выявления антител, титр которых определяли в реакции связывания комплемента. При наличии титра не менее 1 : 160 — 1 : 200 (+ + + +) кроликов обескровливали через a. carotis.
Полученную кровь помещали в термостат на 30 мин при 37°, затем в стерильных условиях отделяли сгусток от стенок пробирки и оставляли пробирки с кровью в холодильнике для лучшей ретракции сгустка до следующего дня. Образовавшуюся сыворотку отсасывали, разливали в ампулы и хранили в холодильнике при +4°.
Цитотоксические сыворотки, специфичные к ткани семенников и яичников человека, получали аналогичным методом. Антигенами для получения этих сывороток служили водно-солевые экстракты ткани семенников мужчин или яичников женщин.
Ткани брали от здоровых людей в возрасте 20 — 40 лет, погибших от несчастных случаев. Материал отбирался только при наличии заключения прозекторов.
«Действие специфических цитотоксических сывороток
на половые железы», под ред. Р.Е.Кавецкого
