13 марта 2009

Определение креатинина в моче

К 0,1 мл мочи добавляют 0,6 мл 1,2% раствора пикриновой Э0 кислоты и 0,04 мл 10% раствора едкого натра. Доводят объем до 10 мл дистиллированной водой. Готовят стандартную пробу (0,05 мл основного раствора креатинина, 0,6 мл 1,2% раствора пикриновой кислоты, 0,04 мл 10% раствора едкого натрия и доводят до 10 мл дистиллированной водой). Все пробы выдерживают 15 мин при комнатной температуре, после чего фотометрируют.

Расчет производят по формуле: ((Э0*0,05*1000)/Эс0с)*50,

где:

  • 0,05 — количество креатинина в стандартной пробе (мг);
  • 1000 — разведение мочи.

Минутный диурез рассчитывают по объему собранной мочи, деленному на количество минут, в течение которых производился сбор мочи.

Расчет клиренса эндогенного креатинина ведут по формуле: Ccr=(Ucr/V)/P,

где:

  • Сcr — клиренс креатинина, мл/мин;
  • Р — концентрация креатинина в крови (ммоль);
  • Ucr — концентрация креатинина в моче (ммоль);
  • V — минутный диурез (мл/мин).

Полученную величину абсолютного клиренса пересчитывают на стандартную поверхность тела взрослого человека (1,73 м2):

(Абсолютный клиренс*1,73)/Поверхность тела больного

Поверхность тела исследуемого определяют по формуле Любуа или по номограмме. В норме у взрослых и у детей в возрасте старше 1 года величина клиренса по эндогенному креатинину в среднем 100 мл/мин. Величина клубочковой фильтрации у новорожденных детей составляет 30 — 50 % величины клубочковой фильтрации у взрослого.

«Детская урология», Н.А. Лопаткин





После окончания электрофореза пластинки перекладывают в специальную камеру для окраски, заливают красящую смесь и инкубируют в термостате 2 ч при 37 °С. Затем сливают смесь и несколько раз тщательно промывают агаровые пластинки дистиллированной водой. Сушку пластинок производят следующим образом: вырезанные по форме пластинки полоски хроматографической бумаги осторожно накладывают на агар, не сдвигая его. На чистую…

Общая активность ЛДГ в моче больных пиелонефритом в среднем достигает 37,5 ± 3,5 единицы Вроб-левского, но какой-либо зависимости ее от формы и степени тяжести пиелонефрита не отмечено. Перспективными для изучения при воспалительных заболеваниях почек являются ферменты малатдегидрогеназа (МДГ) и альдолаза (АЛД). МДГ относится к ферментам цикла Кребса, который катализирует обратимую реакцию окисления яблочной кислоты в…

Исследуемые сыворотки разводят 1:10 с помощью кроличьей сыворотки (в разведении 1:250), подогревают в электрической водяной бане при 54 °С в течение 20 мин (для разрушения комплемента) и охлаждают. Затем к ним добавляют формалинизированные или свежие эритроциты барана из расчета 0,2 мл на 1 мл сыворотки, содержимое пробирки встряхивают и помещают на 30 мин в термостат…

Приготовленные Аг разводят определенным количеством буфера (рН 6,4) и соединяют с раствором формалинизированных и танизированных эритроцитов в таком количестве, чтобы окончательное разведение Аг было 1:10. Установлено, что именно это разведение является оптимальным, так как не дает гемолиза или агглютинации эритроцитов в отсутствие специфической сыворотки. Содержимое колбочек встряхивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 1…

Свежевыпущенную мочу центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин, отсасывают надосадочную жидкость и осадок дважды промывают в изотоническом растворе хлорида натрия с фосфатным буфером (рН 7,3). В отмытый осадок добавляют 0,2 мл разведенной 1:5 люминесцирующей кроличьей сыворотки против глобулинов человека. Осадок мочи вместе с сывороткой инкубируют при 37 °С в течение 30 мин, после…