14 декабря 2010

Окрашивание толуидиновым синим

Фиксация особенного значения не имеет, срезы можно приготовить на замораживающем микротоме, а также после заливки в парафин. Перед окрашиванием их помещают в изотонический раствор хлорида натрия на 3 ч при температуре 37 °С, затем переносят в 0,5% раствор толуидинового синего на 18 ч.

После этого срезы быстро промывают в трижды сменяемой дистиллированной воде, высушивают фильтровальной бумагой, ополаскивают в 96% этиловом спирте и в смеси равных частей абсолютного спирта и ксилола, просветляют в ксилоле и заключают в канадский бальзам.

Для идентификации гликозаминогликанов необходимо произвести обработку контрольных срезов гиалуронидазой, как указано выше.

Результаты методов окраски следующие

Метод окраски Что выявляется Результат
Гематоксилином и эозином Клеточные элементы и волокнистые структуры Ядра — фиолетовые; коллагеновые волокна, мышцы, нервы — ярко-красные
Ван-Гизона Коллагеновые волокна Коллагеновые волокна — малиновые; ядра, мышцы, нервы, эпителиальные клетки — ярко-желтые
Суданом оранжевым Нейтральные жиры Нейтральный жир — оранжевый
Реакция Перльса Гемосидерин Гемосидерин внутри- и внеклеточный — сине-зеленый
Реакция Косса Отложение солей кальция Соли кальция — черные
Конго красным Амилоид Отложение амилоида — ярко-красные, в поляризационном микроскопе — зеленые
Фута Аргирофильный белок Аргирофильный белок и аргирофильные волокна — черные
ШИК-реакция (метод Мак-Маиуса) Гликоген, нейтральные МПС, грибы Гликоген (диастазолабильпый) — темно-малиновый; нейтральные МПС (диастазорезистентные) —
малиновые, грибы — ярко-малиновые
Толуидиновым синим Гликозаминогликаны Гликозаминогликаны — сиренево-розовые; остальные структуры — голубые
Романовского — Гимзы Тканевые базофилы, гликозаминогликаны, эозинофильные гранулоциты, лейшмании Гранулы тканевых базофилов — метахроматично пурпурные; эозинофильные гранулоциты и лейшмании
— красные
Браше Рибонуклеонротеиды Рибонуклеиновая кислота — красного цвета
Шуенинова Фибрин Отложения фибрина — темно-синие
Грам — Вейгерта Грибы Грибы — темно-фиолетовые
Цпль — Нильсена Кислотоустойчивые микобактерии Микобактерии лепры, туберкулеза — красные

«Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи»,
Г.М.Цветкова, В.К.Мордовцев

Читайте далее:



В 40 мл дистиллированной воды растворяют 80 мг нитрата серебра. К 10 мл раствора прибавляют 8 капель 40% гидроокиси натрия до получения осадка. Затем по каплям продолжают добавлять аммиак до растворения осадка, после чего до 40 доливают дистиллированную воду. Раствор должен быть бесцветным. Окраска азокармином по методу Гейденгайна выявляет белки соединительной ткани и плазмы крови….

0,25% водный раствор азокармина кипятят несколько раз, охлаждают и к 100 мл красителя прибавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты. Анилиновый спирт получают путем добавления к 50 мл 96% спирта 3 капель анилинового масла. Большое диагностическое значение имеют также исследования с помощью поляризационного микроскопа для выявления двоякопреломляющих липидов инородных тел и амилоида. Двоякопреломляющие липиды характерны для…

С целью более элективной окраски рекомендуется фиксировать биопсированный кусочек в ацетоне с последующей заливкой в парафин. Биоптат помещают в холодный ацетон на 2 ч (в холодильнике), затем выдерживают в двух порциях 96% этанола (в каждой — сутки), в двух порциях абсолютного спирта (в каждой по 12 ч). Затем помещают в касторовое или анилиновое масло до…

Фиксация различная. Парафиновые срезы на сутки помещают в 3% раствор перекиси водорода, затем на 15 — 20 мин в карболовый гематоксилин (гематоксилин 1,75 г + 200 мл дистиллированной воды + 5 г кристаллической карболовой кислоты + 10 мл 10% фосфорно-вольфрамовой кислоты), ополаскивают дистиллированной водой, дифференцируют в 10% растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты (до 1 сут), несколько часов…

Измельченные кусочки подвергаются предварительной фиксации в 4% глютаральдегиде, забуференном 0,1 М какодилатным буфером (рН 7,3) в течение 2 ч при температуре 4 °С. Хорошие результаты дает также применение 0,1 М фосфатного буфера (рН 7,3). Затем кусочки промывают в 0,2 М растворе сахарозы па какодилатном буфере в течение 12 ч и фиксируют в течение 2 ч…