14 декабря 2010

Окраска по методу Браше

С целью более элективной окраски рекомендуется фиксировать биопсированный кусочек в ацетоне с последующей заливкой в парафин. Биоптат помещают в холодный ацетон на 2 ч (в холодильнике), затем выдерживают в двух порциях 96% этанола (в каждой — сутки), в двух порциях абсолютного спирта (в каждой по 12 ч).

Затем помещают в касторовое или анилиновое масло до просветления ткани, далее в ксилол (по 30 мин в двух порциях). Из ксилола переносят в смесь парафина и ксилола (1:1) и затем, как обычно, заливают в парафин.

Парафиновые срезы из дистиллированной воды помещают в раствор метилового зеленого
— пиронина на 20 — 30 мин, затем споласкивают водой и высушивают фильтровальной бумагой, ополаскивают в ацетоне, смеси ацетона и ксилола в равных соотношениях, смеси 3 частей ксилола и 1 части ацетона, далее просветляют в ксилоле и заключают в канадский бальзам.

Приготовление метилового зеленого — пиронина. В делительную воронку помещают 50 мг метилового зеленого, 10 мл дистиллированной воды и 30 мл хлороформа.

Смесь несколько раз встряхивают и сливают осторожно хлороформ, затем его снова наливают, встряхивают, процедуру повторяют 3 раза, пока хлороформ не станет светлым. Последний раз, сливая хлороформ, сливают и немного красителя.

Затем берут 90 мг пиронина, прибавляют 9 мл дистиллированной воды. К 9 мл этого раствора прибавляют 4 мл приготовленного раствора метилового зеленого, затем доливают до 25 мл дистиллированной воды и прибавляют 25 мл ацетатного буфера (рН 4,8). Готовый раствор может находиться в холодильнике длительное время.

Дл выявления в тканях фибрина, что очень важно для диагностики аллергических заболеваний кожи, применяют метод Шуенинова.

«Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи»,
Г.М.Цветкова, В.К.Мордовцев

Читайте далее:



Метод Шифф — йодная кислота применяется для выявления гликогена и нейтральных МПС. Наиболее распространена модификация Хочкисса и МакМануса. Фиксация и способы приготовления срезов различны. Срезы из дистиллированной воды переносят на 15 мин в раствор нерйодата натрия или калия (350 мг перйодата калия или натрия + 50 мл дистиллированной воды + 0,5 мл 35% азотной кислоты),…

Срезы, полученные из материала, фиксированного разными способами, помещают в 12% нейтральный формалин на 1 сут, после чего ополаскивают их дистиллированной водой и оставляют в ней на 10 — 15 мин. Затем срезы переносят в раствор перманганата калия (100 мг перманганата калия + 40 мг дистиллированной воды) на 10 мни, хорошо отмывают в нескольких порциях дистиллированной…

В 40 мл дистиллированной воды растворяют 80 мг нитрата серебра. К 10 мл раствора прибавляют 8 капель 40% гидроокиси натрия до получения осадка. Затем по каплям продолжают добавлять аммиак до растворения осадка, после чего до 40 доливают дистиллированную воду. Раствор должен быть бесцветным. Окраска азокармином по методу Гейденгайна выявляет белки соединительной ткани и плазмы крови….

0,25% водный раствор азокармина кипятят несколько раз, охлаждают и к 100 мл красителя прибавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты. Анилиновый спирт получают путем добавления к 50 мл 96% спирта 3 капель анилинового масла. Большое диагностическое значение имеют также исследования с помощью поляризационного микроскопа для выявления двоякопреломляющих липидов инородных тел и амилоида. Двоякопреломляющие липиды характерны для…

Фиксация различная. Парафиновые срезы на сутки помещают в 3% раствор перекиси водорода, затем на 15 — 20 мин в карболовый гематоксилин (гематоксилин 1,75 г + 200 мл дистиллированной воды + 5 г кристаллической карболовой кислоты + 10 мл 10% фосфорно-вольфрамовой кислоты), ополаскивают дистиллированной водой, дифференцируют в 10% растворе фосфорно-вольфрамовой кислоты (до 1 сут), несколько часов…