14 декабря 2010

Биопсия кожи

Биопсию кожи лучше производить циркулярным полном, который значительно упрощает взятие материала и не травмирует прилежащие участки.

Для постановки патологоанатомического диагноза большое значение имеют правильная фиксация и последующая обработка биопсированного кусочка кожи. Лучшим фиксатором для обычных гистологических целей является 10% нейтральный формалин. Его количество должно превышать в 50 раз объем биоптата. Так, биоптат размером 1 X 1 см помещают в 50 мл формалина.

Минимальное время фиксации — 1 сут, удлинение срока фиксации улучшает качество препарата. Недопустимо оставлять биопсированный материал длительное время без фиксатора или помещать его в изотонический раствор хлорида натрия, как это иногда практикуется. В таких случаях биоптат высыхает, сморщивается или подвергается аутолизу, становясь непригодным для диагностических целей.

Уплотнять кусочек лучше в парафине, что позволяет более детально изучить клеточные элементы. При необходимости получения быстрого ответа или для специальной окраски (на жиры, обнаружение нервных волокон) используют срезы, полученные на замораживающем микротоме.

Срезы должны быть тонкими (5 — 10 мкм), просматривать нужно несколько срезов, лучше серию их для определения более характерных черт того или иного заболевания.

Обязательно долины быть применены три основные окраски срезов: гематоксилин и эозин для получения данных об общей морфологической картине биопсированной кожи, пикрофуксин но методу Ван-Гизона для изучения соединительной ткани, резорцин-фуксин по методу Вейгерта для определения состояния эластических волокон. Указанные методы окраски изложены в руководствах С. С. Вайля (1947), Г. А. Меркулова (1956), В. Г. Елисеева (1967).

Парафиновые срезы кожи мы рекомендуем окрашивать гематоксилином Эрлиха не менее 30 мин с докраской эозином. В отличие от окраски пикрофуксином по методу Ван-Гизона мы предлагаем удлинить экспозицию в гематоксилине Эрлиха и пикрофуксине соответственно до 10 и 30 мин.

Кроме того, в некоторых случаях требуется дополнительно производить окраску по методу Грама — Вейгерта для обнаружения патогенных грибов, импрегнацию серебром по методу Фута для выявления аргирофильных или ретикулиновых волокон, что особенно важно при диагностировании лимфом, окраску Суданом оранжевым на жир, реакцию Перльса на железо.

«Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи»,
Г.М.Цветкова, В.К.Мордовцев

Читайте далее:



Фиксация особенного значения не имеет, срезы можно приготовить на замораживающем микротоме, а также после заливки в парафин. Перед окрашиванием их помещают в изотонический раствор хлорида натрия на 3 ч при температуре 37 °С, затем переносят в 0,5% раствор толуидинового синего на 18 ч. После этого срезы быстро промывают в трижды сменяемой дистиллированной воде, высушивают фильтровальной…

Гистохимические методы исследования в основном применяются для научных целей, однако некоторые из них имеют диагностическое значение, как, на пример, ШИК-реакция, окраска альциановым голубым или толуидиновым синим, азаном по методу Гейденгайна и др. С помощью ШИК-реакции выявляют полисахариды: гликоген и муконолисахариды (МПС), особенно нейтральные. Эта реакция необходима для определения ШИК-положительных фибриноида и фибрина. Грибы и хитиновые…

Метод Шифф — йодная кислота применяется для выявления гликогена и нейтральных МПС. Наиболее распространена модификация Хочкисса и МакМануса. Фиксация и способы приготовления срезов различны. Срезы из дистиллированной воды переносят на 15 мин в раствор нерйодата натрия или калия (350 мг перйодата калия или натрия + 50 мл дистиллированной воды + 0,5 мл 35% азотной кислоты),…

Срезы, полученные из материала, фиксированного разными способами, помещают в 12% нейтральный формалин на 1 сут, после чего ополаскивают их дистиллированной водой и оставляют в ней на 10 — 15 мин. Затем срезы переносят в раствор перманганата калия (100 мг перманганата калия + 40 мг дистиллированной воды) на 10 мни, хорошо отмывают в нескольких порциях дистиллированной…

В 40 мл дистиллированной воды растворяют 80 мг нитрата серебра. К 10 мл раствора прибавляют 8 капель 40% гидроокиси натрия до получения осадка. Затем по каплям продолжают добавлять аммиак до растворения осадка, после чего до 40 доливают дистиллированную воду. Раствор должен быть бесцветным. Окраска азокармином по методу Гейденгайна выявляет белки соединительной ткани и плазмы крови….