13 января 2012

Метод диффузии в агар

Метод диффузии в агар (метод дисков). При определении чувствительности микробов методом диффузии в агар на поверхность агара, засеянного испытуемыми микробами, помещают диски, пропитанные антибиотиками. Диски вырабатываются из специального картона — ГОСТ 6722-65, диаметром 6 мм. Содержание антибиотика в диске, указанное на этикетке, соответствует рекомендациям ВОЗ.

В стерильные чашки Петри, расположенные на горизонтальной поверхности, разливают по 15 мл плотной питательной среды (перевар Хоттингера с содержанием 110—130 мг% аминного азота). Чашки подсушивают в течение 30 мин при 37° с полуоткрытой крышкой. На поверхность застывшего агара наливают 1 мл 2-миллиардной суспензии испытуемой суточной культуры.

Бактериальную взвесь распределяют на поверхности чашки равномерно, а ее избыток удаляют путем отсасывания пастеровской пипеткой. На поверхность засеянного агара пинцетом раскладывают диски с антибиотиками. Каждая чашка может служить для испытания действия 5—6 антибиотиков. Диски раскладывают на расстоянии 2,5 см от центра чашки. Необходимо плотное прилегание диска к поверхности агара. Затем чашки инкубируют в термостате при 37° в течение 16—18 ч. Результаты учитывают путем изменения зон задержки роста микробов вокруг дисков (включая диаметр самого диска). Отсутствие зоны задержки роста микроба вокруг диска свидетельствует о том, что испытуемый штамм не чувствителен к данному антибиотику, при зоне диаметром до 10 мм штамм расценивается как мало чувствительный. Единичные колонии или тонкая пленка роста внутри зоны задержки роста не учитываются. Размер зон может меняться в зависимости от толщины слоя агара, густоты микробного газона, состава среды. Однако в стандартных условиях опыта по величине зон, образуемых антибиотиком, можно судить о степени чувствительности исследуемого микроба.

При определении чувствительности возбудителей к тетрациклинам (тетрациклин, хлортетрациклин, окситетрациклин) в связи с полной перекрестной устойчивостью микробов к этим антибиотикам можно применять диски лишь с одним препаратом этой группы. В ответе при этом указывают чувствительность (устойчивость) выделенной культуры к тетрациклинам.

Зависимость величины зон от степени чувствительности микроорганизмов

Степень чувствительности штамма Диаметр зоны задержки роста в мм
Высокочувствительный и чувствительный 15—25 и более
Умеренно чувствительный 11—15
Устойчивый Менее 10 или полное отсутствие зон


«Справочник по антибиотикам», С.М.Навашин, И.П.Фомина



К числу особых показаний относится применение цефалоридина при лечении бактериальных инфекций у больных с аллергией к пенициллинам. Методы применения цефалоридина Препарат применяют в основном внутримышечно. При тяжелом течении инфекций при необходимости быстрого создания высоких концентраций антибиотика в крови цефалоридин вводят внутривенно (микроструйно или капельным путем). В зависимости от вида возбудителя и тяжести течения болезни суточная…

Цефалотин

Синонимы: Keflin. Физико-химические свойства 7-(Тиофен-2-ацетамидо) цефалоспорановая кислота (натриевая соль). Суммарная формула C16H16N2О6S2Na. Молекулярный вес 396,4. Белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде, стабилен в сухом состоянии. В растворе при 37° через 12 ч теряет 11— 23% активности, через 24 ч — около 40%, через 48 ч — 55%. В присутствии человеческой сыворотки при комнатной температуре…

По особенностям фармакокинетики цефалотин близок цефалоридину, отличаясь от него высотой создаваемых в крови уровней и большей скоростью выведения из организма. Цефалотин плохо всасывается при приеме внутрь, а основным методом его применения является парентеральное введение (внутримышечное или внутривенное). Максимальный уровень в крови после внутримышечного введения в дозе 500 мг — 1 г обнаруживается через 30 мин…

Основным методом применения цефалотина является внутримышечное введение. При инфекциях, обусловленных грамположительными возбудителями, суточная доза антибиотика составляет 2—3 г (разовая доза 500 мг при интервале между введениями 4—6 ч). При заболеваниях, вызываемых грамотрицательными микроорганизмами (вследствие их более низкой чувствительности к антибиотику), антибиотик назначают в суточной дозе 4—6 г, при тяжелом течении инфекций — 12 г и…

Цефалоспорины

К этой группе относится ряд природных антибиотиков и многочисленных полусинтетических препаратов, полученных на основе 7-аминоцефалоспоран6вой кислоты (7:АЦК), среди которых наибольшее практическое применение нашли цефалотин, цефалоридин, цефалексин и цефалоглицин. 7-Аминоцефалоспорановая кислота Основными особенностями антибиотиков этой группы являются: широкий спектр антибактериального действия, устойчивость к действию стафилококковой пеницилазы и высокая активность в отношении устойчивых к бензилпенициллину пеницилазообразующих стафилококков;…